骨巨細(xì)胞瘤中ANGPTL4的調(diào)控機(jī)制研究.pdf

1、研究背景及目的：骨巨細(xì)胞瘤是一種較為常見的原發(fā)性骨腫瘤，好發(fā)于人體長骨的干骺端，也可見于骶骨，骨盆和脊柱部位。骨巨細(xì)胞瘤主要由三種細(xì)胞成分構(gòu)成:破骨細(xì)胞樣的多核巨細(xì)胞，梭形基質(zhì)細(xì)胞和單核前體細(xì)胞。其中，梭形基質(zhì)細(xì)胞起源于人體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，被認(rèn)為是骨巨細(xì)胞瘤中的腫瘤成分。骨巨細(xì)胞瘤是一種良性腫瘤，但是具有一定程度的潛在侵襲性生物學(xué)行為，可以發(fā)生惡變，
　　甚至出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。目前，手術(shù)切除治療是骨巨細(xì)胞瘤的主要治療方式，但是文獻(xiàn)報(bào)

2、道的手術(shù)切除后的腫瘤復(fù)發(fā)率仍有18％到60％之高。骨質(zhì)破壞是骨巨細(xì)胞瘤的典型的生物學(xué)特征，但其發(fā)生發(fā)展機(jī)制仍然沒有被完全研究清楚，因此進(jìn)一步研究骨巨細(xì)胞瘤的生物學(xué)特點(diǎn)有助于腫瘤的防治。
　　ANGPTL4是血管生成素相關(guān)蛋白家族中的一員，主要參與人體的血管形成和糖脂代謝。在人體中，ANGPTL4主要由肝臟，脂肪組織，胎盤以及缺血組織分泌，并且受饑餓和缺氧等因素調(diào)控，其可通過旁分泌或內(nèi)分泌途徑調(diào)節(jié)脂肪代謝并作為PPARs的靶向受體。

3、近些年來，由于ANGPTL4在血管生成，炎癥和缺氧中的作用，其在腫瘤的發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移中的作用備受關(guān)注，但ANGPTL4在腫瘤中的研究程度遠(yuǎn)不及在糖脂代謝中的清楚。已有研究表明，ANGPTL4在透明細(xì)胞腎癌和口腔鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)明顯升高，此外，由腫瘤分泌的ANGPTL4可以介導(dǎo)乳腺癌的肺部轉(zhuǎn)移。但是，ANGPTL4在骨巨細(xì)胞瘤中的表達(dá)和作用少有研究。
　　TGF-β信號通路在人體幾乎所有細(xì)胞類型中都起著關(guān)鍵作用，該通路在胚胎發(fā)育和維

4、持組織穩(wěn)態(tài)中也起著重要作用。細(xì)胞因子TGF-β具有多種功能，參與調(diào)節(jié)人體微環(huán)境中傳感器和調(diào)節(jié)器的生成，如細(xì)胞因子，細(xì)胞外基質(zhì)成分和細(xì)胞表面受體。TGF-β信號通路在腫瘤中的作用存在爭議，有的研究認(rèn)為該通路可以抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展;有研究表明該通路參與細(xì)胞侵襲，免疫調(diào)節(jié)和微環(huán)境修改，從而促進(jìn)了腫瘤惡化。有研究表明，TGF-β作用于發(fā)基因ANGPTL4，通過肺部破壞毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞穩(wěn)定性，進(jìn)而促進(jìn)乳腺癌的肺部轉(zhuǎn)移。但是，TGF-β-ANGPT

5、L4信號通路在其他類型腫瘤中仍無研究。
　　研究內(nèi)容及方法：在該實(shí)驗(yàn)中，首先通過WB，qRT-PCR，IHC和HE染色證明了ANGPTL4在骨巨細(xì)胞瘤基質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)明顯增高，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)TGF-β2在骨巨細(xì)胞瘤中表達(dá)增高并證明TGF-β2對ANGPTL4的調(diào)控作用，隨后構(gòu)建了ANGPTL4-/-Knockout穩(wěn)轉(zhuǎn)株，并在細(xì)胞水平證明了ANGPTL4介導(dǎo)破骨細(xì)胞分化及成血管作用，最后構(gòu)建了骨巨細(xì)胞瘤的雞胚模型，以觀察ANGPTL4在

6、體內(nèi)水平對骨巨細(xì)胞瘤的作用及成血管功能。
　　研究結(jié)果及結(jié)論：證明了ANGPTL4在骨巨細(xì)胞瘤中表達(dá)增高，并首次在骨巨細(xì)胞瘤中證明了ANGPTL4對破骨細(xì)胞分化和血管形成的重要作用，證據(jù)如下:1、證實(shí)了ANGPTL4在骨巨細(xì)胞瘤中的高表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)TGF-β2上調(diào)表達(dá)及其對ANGPTL4的調(diào)控作用;2、通過構(gòu)建ANGPTL4-/-Knockout穩(wěn)轉(zhuǎn)株，在細(xì)胞水平闡述了ANGPTL4介導(dǎo)破骨細(xì)胞分化，骨質(zhì)溶解及成血管作用;3、構(gòu)建了