破骨細(xì)胞分化因子及其受體在骨巨細(xì)胞瘤中的表達(dá)及意義.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)采用RT-PCR、免疫組化、細(xì)胞培養(yǎng)方法,分別從mRNA及蛋白水平研究ODF、OPG、RANK在GCT中的表達(dá),探討它們與GCT中較豐富的破骨細(xì)胞樣多核巨細(xì)胞形成的關(guān)系,并進(jìn)一步了解ODF、OPG由哪種細(xì)胞表達(dá)及其表達(dá)的意義,以及與腫瘤的分級(jí)和預(yù)后的關(guān)系.材料與方法:1.材料(1)取GCT新鮮標(biāo)本5例,GCT傳代細(xì)胞2株—GT-55、GT-56(為液氮凍存細(xì)胞株,凍存前分別為原代培養(yǎng)至第10代、第2代),骨肉瘤細(xì)胞2株-MG63、

2、U2OS.(2)收集有完整病例記錄的骨巨細(xì)胞瘤病例44例,找出每例有代表性的玻片按Jaffe分級(jí)法重新分級(jí),并找出相應(yīng)蠟塊切片.2.方法(1)RT-PCR檢測(cè)GCT組織、細(xì)胞株及對(duì)照組骨肉瘤細(xì)胞株中ODF、OPG、RANKmRNA表達(dá).(2)免疫組化檢測(cè)GCT組織中ODF、OPG蛋白表達(dá).(3)細(xì)胞爬片免疫組化,分別檢測(cè)ODF、OPG和Ki67的表達(dá).結(jié)論:1.GCT組織中有ODF、OPG、RANK mRNA表達(dá),ODF表達(dá)豐富,ODF

3、/OPG比值遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于骨肉瘤,很可能跟GCT組織中大量破骨細(xì)胞樣多核巨細(xì)胞的形成有關(guān).2.GT-55、GT-56細(xì)胞中僅有大量OPG mRNA表達(dá),而缺乏ODF和RANK mRNA的表達(dá),可能與GCT細(xì)胞培養(yǎng)傳代后多核巨細(xì)胞的逐漸減少和消失有關(guān).3.GCT組織單核基質(zhì)細(xì)胞和多核巨細(xì)胞及GT-56單個(gè)核基質(zhì)細(xì)胞中均有ODF、OPG蛋白的表達(dá),ODF陽性細(xì)胞以梭形單個(gè)核基質(zhì)細(xì)胞為主,且單核基質(zhì)細(xì)胞ODF與多核巨細(xì)胞OPG蛋白表達(dá)間呈正相關(guān).4