新型口腔表面麻醉劑藥效學及相關基礎研究.pdf

1、目的:
　　口腔表面麻醉劑具有操作簡單、無痛、無損傷、減少患者對疼痛恐懼感和避免注射疼痛等優(yōu)點。為研究一種滲透力強、麻醉效果好且副作用小的口腔表面麻醉劑，本研究對LID-LLD-PLVs（Lidocaine hydrochloride lysine-linoleic acid modified dextran polymeric lipid vesicles，載鹽酸利多卡因葡聚糖基納米高分子脂質(zhì)體）進行藥效學及相關基礎研究，為臨床

2、應用提供理論基礎。
　　方法:
　　1、LID-LLD-PLVs透皮性能實驗研究
　　采用Franz擴散池和HPLC分析方法研究LID-LLD-PLVs體外滲透性和應用CLSM觀察LLD-PLVs包載鈣黃綠素于在體小鼠皮膚的滲透深度，共同評價其皮膚滲透能力。
　　2、LID-LLD-PLVs麻醉效果初探
　　采用家兔角膜反射實驗考察LID-LLD-PLVs表面麻醉效果和蟾蜍坐骨神經(jīng)動作電位實驗考察其對神經(jīng)組

3、織的穿透能力，對LID-LLD-PLVs麻醉效果進行初步評價。
　　3、LID-LLD-PLVs安全性評價
　　采用MTT法考察LID-LLD-PLVs對HGFs（Human Gingival Fibroblasts，人牙齦成纖維細胞）的細胞毒性和豚鼠皮膚刺激性實驗考察LID-LLD-PLVs對活體皮膚刺激性，并進行組織學觀察。
　　4、LID-LLD-PLVs口腔表面麻醉效果與作用機制研究
　　采用家兔牙齦針刺

4、實驗、頦神經(jīng)動作電位實驗考察LID-LLD-PLVs對家兔牙齦表面麻醉效果和通過檢測牙齦、三叉神經(jīng)節(jié)、延髓中SP、CGRP和c～fos水平探討口腔黏膜表面麻醉作用機制。
　　5、LID-LLD-PLVs藥代動力學研究
　　LID-LLD-PLVs涂抹于家兔前牙牙齦，采用HPLC法檢測LID血藥濃度并擬合藥代動力學參數(shù)，探討LID-LLD-PLVs藥代動力學特點。
　　結(jié)果:
　　1、12h LID透皮滲透量:LI

5、D-LLD-PLVs＞LID-CLs(Lidocaine hydrochloride conventional liposomes，載鹽酸利多卡因傳統(tǒng)脂質(zhì)體)＞LID-IJ(Lidocaine hydrochloride injection，鹽酸利多卡因注射液）(P＜0.05)，LID-LLD-PLVs滲透速率為LID-CLs的1.81倍和LID-IJ的3.65倍。CLSM觀察發(fā)現(xiàn)鈣黃綠素-LLD-PLVs1.5h可以滲透小鼠皮膚全層，

6、深度達100μm，明顯超過鈣黃綠素-CLs和游離鈣黃綠素(P＜0.05)。
　　2、與LID-IJ和LID-CLs相比，LID-LLD-PLVs對蟾蜍坐骨神經(jīng)動作電位幅度抑制最強(P＜0.05)，最大抑制率達64.32％;家兔角膜反射消失時間無顯著性差異(P＞0.05)。
　　3、50、100、200μg/mL3種濃度的LID-LLD-PLVs、LID-IJ、LID-CLs與對照組的A570nm無顯著性差異(P＞0.05)，

7、3種濃度LID-LLD-PLVs對HGFs的細胞毒性為0級和1級，對豚鼠完整皮膚無刺激性，豚鼠表皮結(jié)構完整，真皮內(nèi)無炎性病理改變。
　　4、LID-LLD-PLVs應用于家兔前牙牙齦，針刺測試麻醉起效時間為26.67min，明顯快于LID-CLs組。頦神經(jīng)動作電位幅度抑制率比較結(jié)果為:LID-LLD-PLVs＞LID-CLs＞LID-IJ(P＜0.05)。LID-LLD-PLVs實施于牙齦表面30min、60min和90min后，

8、牙齦、三叉神經(jīng)節(jié)和延髓中SP、CGRP和c-fos表達水平均有不同程度降低，但給藥時間和取樣部位不同，降低程度也不同。
　　5、LID-LLD-PLVs經(jīng)家兔牙齦表面給藥后的峰值血藥濃度(Cmax)為1.679μg·mL-1，半衰期(t1/2)為3.859h，均小于LID-IJ注射給藥(P＜0.05)。兩者的血漿藥物濃度達峰時間(Tmax)無顯著性差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、LID-LLD-PLVs經(jīng)皮

9、滲透速度、滲透量和滲透深度均明顯高于同濃度的LID-CLs和LID-IJ，而且無滲透時滯。
　　2、LID-LLD-PLVs表面麻醉效果較好，體外麻醉神經(jīng)纖維數(shù)量多、作用強。
　　3、LID-LLD-PLVs無明顯細胞毒性和皮膚刺激性。
　　4、LID-LLD-PLVs口腔黏膜麻醉起效時間明顯短于LID-CLs，其作用機制是抑制了牙齦、三叉神經(jīng)節(jié)和延髓中SP、CGRP和c-fos的表達水平。
　　5、LID-LL