植物病原真菌拮抗菌TG116的鑒定、生物學(xué)特性及生防機(jī)理研究.pdf

1、植物真菌病害導(dǎo)致的農(nóng)作物減產(chǎn)和采后損失一直以來都是阻礙農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的關(guān)鍵問題之一，生物防治植物真菌病害因?yàn)樵趹?yīng)用中具有對(duì)環(huán)境安全、無污染、特異性強(qiáng)、不產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)而受到越來越多的關(guān)注。內(nèi)生菌可以被用來防治植物真菌病害，并且部分菌株已經(jīng)被研發(fā)成生物農(nóng)藥用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)當(dāng)中。獨(dú)角蓮具有廣泛的藥理作用和豐富的化學(xué)成分，并且在生長(zhǎng)過程中不易感染病蟲害，聯(lián)系植物內(nèi)生菌的廣泛生物學(xué)功能推測(cè)，與獨(dú)角蓮長(zhǎng)期協(xié)同進(jìn)化的內(nèi)生菌也可能具有一定的獨(dú)特性和研究?jī)r(jià)值，

2、已有研究也表明藥用植物中含有豐富的生物防治資源菌，但關(guān)于獨(dú)角蓮內(nèi)生菌的研究還未見報(bào)道。
　　為了給生物防治植物真菌病害提供新的菌種資源，本研究對(duì)獨(dú)角蓮中的內(nèi)生菌進(jìn)行了分離，并篩選得到了一株廣譜植物病原真菌拮抗菌 TG116，測(cè)定了菌株 TG116對(duì)植物病原真菌的抑菌譜和抑菌特性，通過盆栽防病試驗(yàn)對(duì)其生防潛能進(jìn)行了進(jìn)一步的驗(yàn)證和探索，利用形態(tài)學(xué)、生理生化及分子生物學(xué)方法對(duì)其進(jìn)行了鑒定，并對(duì)其生物學(xué)特性和有關(guān)生物防治植物病害的機(jī)理進(jìn)行

3、了研究，結(jié)果如下：
　　（1）菌株 TG116能夠拮抗供試的7種不同植物病原真菌，抗菌譜較廣，并且可以使植物病原真菌菌絲原生質(zhì)外滲，菌絲中空、形態(tài)扭曲、變形等，菌株 TG116浸種和灌根的處理在盆栽防病試驗(yàn)中也有較好防治效果，隨著 TG116菌液處理后接種植物病原真菌間隔時(shí)間的延長(zhǎng)，防病效果也有所提高，TG116胞外代謝產(chǎn)物和菌體都有一定的防病效果。
　?。?）菌株TG116的形態(tài)學(xué)及生理生化特征和地衣芽孢桿菌相吻合，16S

4、 rRNA序列的分析比對(duì)結(jié)果顯示其與地衣芽孢桿菌的同源性高達(dá)99％，因而將菌株TG116鑒定為地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）。
　　（3）菌株TG116培養(yǎng)8－16 h生長(zhǎng)處于對(duì)數(shù)期，16 h后進(jìn)入穩(wěn)定期，48 h后進(jìn)入衰退期；最適接種量為1%；在20－60℃的溫度范圍內(nèi)都能夠生長(zhǎng)，45℃為最適生長(zhǎng)溫度；在pH3.0－9.0的范圍內(nèi)都能夠生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)pH為7.0；在1%的NaCl滲透壓條件下生長(zhǎng)最好

5、；對(duì)供試碳源、氮源利用率最高的分別為纖維二糖和酵母粉；菌株TG116對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力較強(qiáng)。
　?。?）在一定時(shí)間段內(nèi)經(jīng)菌株TG116誘導(dǎo)的處理黃瓜葉片中PAL、POD、PPO活性都顯著高于未經(jīng)其誘導(dǎo)的處理，與植物病原真菌共同接種時(shí)以上酶活性升高的幅度比單獨(dú)接種菌株TG116的大，說明同時(shí)接種病原菌有利于菌株TG116誘導(dǎo)抗性的表達(dá)；單獨(dú)接種菌株TG116后，黃瓜葉片中SOD活性也有所上升，但上升幅度并不明顯，MDA含量變化不大且略