姜瘟病病原拮抗菌的篩選與鑒定.pdf

1、本次課題的研究對象—生姜具有多種功效，不僅可以作為藥用，而且還有發(fā)汗、溫胃、潤肺止咳、解毒等作用。但是隨著我國生姜出口需求量的增加，在生姜栽培的過程中，容易感染以青枯菌為首的病害，姜瘟病嚴重的影響了我國生姜的品質(zhì)，造成了大量生姜田地的絕收。姜瘟病病原主要是由青枯假單胞桿菌引起。目前在姜瘟病防治上主要采用物理、化學和生物防治，最常用的生物防治方法主要是通過篩選有效的拮抗菌，在生姜根莖部定殖對姜瘟病具有限制作用的有益菌株。但是目前的生物防治

2、并沒有良好方法應(yīng)用于生產(chǎn)，為進一步尋求有效的防治方法，本次試驗進行了拮抗青枯菌的篩選和鑒定。為獲得良好的防治姜瘟病的方法，產(chǎn)生與擴大生姜的產(chǎn)量，筆者在結(jié)合前人研究的經(jīng)驗根本之上，擬安徽省生姜種植區(qū)的發(fā)病植株根際和健康姜的根際土中分離和篩選對姜瘟青枯菌有拮抗作用的根際促生菌，在對其拮抗性質(zhì)進行初步研究的基礎(chǔ)上，連系形態(tài)、培養(yǎng)特性，生理生化特征的鑒定以及16SrRNA的種屬特異性序列分析等方法，對篩選到的拮抗菌株進行分類鑒定，從而對姜瘟病的

3、生物防治提供經(jīng)濟有效的功能型菌株，為姜瘟病防治上奠定一定的理論基礎(chǔ)，主要研究如下:
　　(1)通過稀釋涂布平板法于高氏、解磷和固氮三種選擇性培養(yǎng)基上篩選和分離拮抗菌，最終于固氮培養(yǎng)基中篩選到兩株拮抗菌，分別為N3和N5。隨后將兩株固氮拮抗菌進行生長競爭試驗以檢測其拮抗能力，發(fā)現(xiàn)N3菌株對姜瘟病具有較好的拮抗效果，拮抗能力為二級，能夠有效的抑制姜瘟病青枯致病菌的發(fā)育生長;而N5菌株對姜瘟病青枯病的拮抗效果一般，拮抗能力為一級，較N3

4、菌株拮抗姜瘟病效果弱。
　　(2)將篩選到的固氮菌株N3和N5進行形態(tài)特征以及生理生化特性的鑒定，通過試驗發(fā)現(xiàn):產(chǎn)吲哚乙酸上，N3菌株總體產(chǎn)吲哚乙酸高于N5菌株，在姜瘟病拮抗菌中定植于生姜中，可以較N5菌株更好的促進植物生長;在溶磷能力上，N3菌株總體溶磷活力相對高于N5菌株，拮抗于生姜中可以更好的融合土壤中磷離子結(jié)合形成化合物，不易流失，預(yù)防土壤病害;在產(chǎn)鐵載體能力上，N3菌株總體產(chǎn)鐵載體能力也略高于N5菌株，可以很好的結(jié)合鐵色