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文檔簡介
1、目的:⑴探討去卵巢大鼠骨密度、骨代謝及骨組織成骨分化、成脂分化和破骨分化相關(guān)基因蛋白表達(dá)的變化;⑵探討鮭魚降鈣素(sCT)對(duì)去卵巢大鼠骨密度及骨代謝影響;⑶探討鮭魚降鈣素對(duì)去卵巢大鼠骨組織成骨分化、成脂分化和破骨分化相關(guān)基因蛋白的影響。
方法:將3月齡雌性SD大鼠24只隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組(SHAM)、去卵巢組(OVX)和降鈣素組(sCT),每組8只。采用雙側(cè)卵巢切除術(shù)復(fù)制骨質(zhì)疏松大鼠模型。sCT組大鼠采用皮下注射sCT
2、2U/kg·d,Sham組及OVX組大鼠頸部皮下注射0.9%生理鹽水5 ml/kg·d。給藥12周,應(yīng)用雙能X線吸收儀法(DXA)測第四腰椎和股骨骨密度(BMD)。ELISA法測量大鼠血清中BGP、PICP及ICTP濃度。HE染色觀察第三腰椎和脛骨近端骨小梁及脂肪細(xì)胞計(jì)數(shù)。脛骨近端骨組織OPG/RANKL蛋白表達(dá)量測量采用免疫組織化學(xué)染色法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR(QRT-PCR)法測量骨髓細(xì)胞RUNX2、PPARγ、OPG及RANKL m
3、RNA表達(dá)量。
結(jié)果:①與SHAM組比較,去卵巢大鼠腰椎和股骨骨量減少,血清骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物BGP、PICP和ICTP升高。與SHAM組比較,去卵巢后大鼠骨髓細(xì)胞RUNX2和PPARγ mRNA表達(dá)增強(qiáng),骨髓腔中脂肪細(xì)胞數(shù)量增多。去卵巢大鼠脛骨干骺端RANKL蛋白和骨髓細(xì)胞RANKL mRNA表達(dá)增強(qiáng),但是OPG蛋白和mRNA表達(dá)無明顯減少。②與OVX組比較,sCT組大鼠腰椎骨量增加,股骨骨量無明顯增加。sCT組血清BGP、P
4、ICP和ICTP水平降低。sCT組大鼠骨髓細(xì)胞RUNX2 mRNA表達(dá)下降,但骨髓腔脂肪細(xì)胞及PPARγ mRNA表達(dá)無明顯下降。降鈣素可以增加脛骨干骺端OPG蛋白和股骨骨髓細(xì)胞OPG mRNA表達(dá),但是對(duì)RANKL蛋白和mRNA表達(dá)無明顯減少。
結(jié)論:⑴去卵巢后大鼠骨組織RANKL及PPARγ表達(dá)增強(qiáng),分別促進(jìn)破骨細(xì)胞和脂肪分化。并且RUNX2反應(yīng)性增強(qiáng),促進(jìn)成骨細(xì)胞分化。因此,大鼠去卵巢后最終表現(xiàn)出骨量丟失和高轉(zhuǎn)換骨代
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