流式熒光法、多腫瘤標志物蛋白芯片和TK1在頭頸部腫瘤的臨床研究.pdf

1、腫瘤標志物(Tumor marker TM)是指在惡性腫瘤發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細胞的基因表達而合成分泌的或是機體對腫瘤反應而異常產(chǎn)生和/或升高的，反映腫瘤存在和生長的一類物質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、激素酶(同工酶)、胺類及癌基因產(chǎn)物等。TM存在于病人的血液、體液、細胞或組織中，可用免疫學、生物化學及分子生物學等方法測定，且對腫瘤的輔助診斷、鑒別診斷、觀察療效、監(jiān)測復發(fā)及預后評價具有一定的價值。
　　 流式熒光法，是激光激發(fā)熒光的發(fā)光類

2、技術(shù)之一，又稱液態(tài)芯片、懸浮陣列，是一個高速度、高通量以及多功能生物技術(shù)平臺，它把激光技術(shù)、編碼微球(Code beads)和最新的高速數(shù)字信號處理器進行了有機的整合，造就了其卓越的檢測特異性和靈敏度，廣泛應用于免疫分析和核酸研究，得到醫(yī)學界和權(quán)威機構(gòu)的高度認可，是臨床診斷領(lǐng)域和生命科學研究中的熱點。而單一的腫瘤標志物檢查難以達到理想的靈敏度和特異性，國內(nèi)外多項研究表明，運用多種腫瘤標志物聯(lián)合檢測，將有助于提高靈敏度和特異性。腫瘤患者血

3、清胸苷激酶-1濃度檢測是近年來研究的熱點之一，已在多數(shù)惡性腫瘤的診斷、療效、預后等方面顯示其獨有的優(yōu)勢，我們試圖通過用流式熒光法、胸苷激酶-1(TK1)試劑盒與多腫瘤標志物蛋白芯片(MTMPC)檢測系統(tǒng)對頭頸部惡性腫瘤患者的血清進行檢測，探討頭頸部惡性腫瘤患者中TK1及其他相關(guān)腫瘤標志物的表達情況。
　　 目的：
　　 探討流式熒光法、多腫瘤標志物蛋白芯片技術(shù)和TK1在頭頸部惡性腫瘤診斷及治療中的價值。
　　 方

4、法：
　　 本課題運用了流式熒光法檢測了4例頭頸惡性腫瘤患者血清中癌胚抗原(CEA)、細胞角質(zhì)素片段19(CY211)和癌抗原125(CA125)等多腫瘤標志物的濃度水平，就該檢測技術(shù)進行了方法學評價，并與多腫瘤標志物蛋白芯片(MTMPC)檢測系統(tǒng)中檢測出的相應的三項腫瘤標志物濃度進行了比較分析。
　　 2.本課題利用抗TK1單克隆抗體建立的免疫印跡增強化學發(fā)光法檢測20例初治鼻咽癌患者治療前及治療后的血清中TK1濃度和

5、20例對照組(正常體檢健康人)的血清TK1濃度并采用免疫酶標法檢測血清中VCA-IgA水平。
　　 結(jié)果：
　　 1.CEA+CY211+CA125檢測的方法學評價：最低檢測限分別是0.0694ng/ml、0.7712ng/ml和0.6461U/ml，遠低于極限(cutoff)值；干擾試驗結(jié)果表明，在一份低值血清樣本中加入高濃度的血紅蛋白、甘油三酯、膽紅素三種干擾物質(zhì)，并不會影響結(jié)果的判斷；批內(nèi)變異系數(shù)和批間異系數(shù)均小于

6、10％；在測定范圍內(nèi)，流式熒光法測定CEA、CY211和CA125三種腫瘤標志物的線性良好；流式熒光法與多腫瘤標志物蛋白芯片(MTMPC)檢測系統(tǒng)中檢測的三種指標相關(guān)性良好。
　　 2.鼻咽癌組治療前STK1濃度2.65(0.90-2.83)pmol/L明顯高于健康體檢者的STK1濃度0.62(0.23-4.38)pmol/L；鼻咽癌治療后組STK1濃度1.25(0.25-7.34)pmol/L比鼻咽癌組治療前STK1濃度2.6

7、5(0.90-2.83)pmol/L明顯下降；鼻咽癌患者中血清TK1陽性率75.7％與VCA-IgA檢出陽性率82.3％相近，鼻咽癌患者治療后TK1陽性率(32.4％)明顯低于VCA-IgA陽性率(75.7％)。
　　 結(jié)論：
　　 1.流式熒光法具有線性范圍廣、靈敏度高、重復性好、節(jié)省時間和樣品等優(yōu)點，具有臨床應用潛力。
　　 2.血清TK1檢測在鼻咽癌患者的臨床診斷中具有一定臨床意義；血清TK1檢測與VCA-