應(yīng)用蛋白芯片篩選早期胃癌血清腫瘤標志物的研究及生物學(xué)分析.pdf

1、研究背景：
　　胃癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，每年國內(nèi)胃癌新發(fā)病例數(shù)約占全球40％,其中90%以上是進展期胃癌，5年生存率只有30*V43%，而早期胃癌的五年生存率可達90%以上。因此，如何早期發(fā)現(xiàn)胃癌以及尋找一種特異且有效的胃癌血清標志物已成為目前研究熱點。
　　蛋白芯片是一種高通量的蛋白監(jiān)測系統(tǒng)技術(shù),可以一次性的檢測得到包括可溶性受體、趨化因子、生長抑制因子、常規(guī)腫瘤標志物、炎癥因子、細胞黏附分子、血管生成與抑制因子等

2、多種涉及信號轉(zhuǎn)化、傳導(dǎo)、細胞周期調(diào)控、細胞結(jié)構(gòu)、細胞凋亡等廣泛領(lǐng)域的人類蛋白質(zhì)及多肽。蛋白芯片目前在尋找腫瘤標志物、新藥研發(fā)、藥物療效觀察及發(fā)病原因的探索等方面體現(xiàn)出較廣泛的應(yīng)用價值。
　　研究目的：
　　選用高通量的蛋白質(zhì)芯片對早期胃癌患者與正常健康對照的血清標本進行檢測,比對兩者之間的差異蛋白譜，以期從中能篩選出有臨床意義的腫瘤標志物，為早期胃癌的篩查、診斷以及個性化治療打下理論基礎(chǔ)。
　　研究方法：
　　1

3、.從我院胃腸外科2013年1月到2013年6月收治的早期胃癌患者中隨機選取3例患者作為病例組，從我院體檢中心隨機篩選3例正常健康成人為正常對照組。
　　2選用Raybiotech公司的AAH-BLG-1000蛋白芯片對早期胃癌組和正常對照組的血清標本分別檢測以篩選早期胃癌患者血清腫瘤標^志物。
　　3.利用PATHER,GO分析等生物信息學(xué)軟件對所篩選出的差異蛋白進行生物學(xué)分析。
　　研究結(jié)果：
　　1.與正常對

4、照組比較，在早期胃癌組血清中發(fā)現(xiàn)10種蛋白質(zhì)表達上調(diào)，包括Mubrn B，PGRP-S，TLR3，TNFRSF12，Acrp30，beta-Catenin，CCR7，beta-Defensin2，Vitronectin，XEDAR，HVEM；
　　2與正常對照組比較，在早期胃癌組血中52種蛋白質(zhì)表達下調(diào)，包括CD40LJCAM4 Lymphotoxin beta R,MCP-2，PLUNC，VEGI，Smad7，CD163，GDF

5、3,LIGHT，Neurturin等。
　　3.對差異蛋白質(zhì)進行一系列的生物信息學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)差異蛋白質(zhì)集中于血管生成、免疫過程、凋亡等生物進程,下調(diào)蛋白質(zhì)在轉(zhuǎn)錄水平主要富集于4個 miRNA:分別為HSA-MIR-520G.4、HSA-MIR-106B.4、HSA-MIR-20A.4和HSA-MIR-93.4。揭示了TGF-beta信號通路、趨化因子信號通路、細胞因子作用通路與早期胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)
　　研究結(jié)論：

6、>　　1.應(yīng)用高通量的蛋白芯片技術(shù)在早期胃癌患者血清中發(fā)現(xiàn)62種有顯著意義的差異表達蛋白，其中10種蛋白表達上調(diào)，52種蛋白表達下調(diào)，而VEGI、CD40L、SMAD7、PLUNC、LTpR，HEVM和Fn14這7個差異蛋白的特征性改變有望成為早期胃癌血清學(xué)的腫瘤標志物。
　　2.生物信息學(xué)分析顯示這些差異蛋白與刺激反應(yīng)、免疫過程、腫瘤細胞增殖、凋亡及血管生成等過程密切相關(guān)。
　　3.對于蛋白信號通路、轉(zhuǎn)錄水平以及基因相互作