應(yīng)用蛋白芯片篩選早期胃癌血清腫瘤標(biāo)志物的研究及生物學(xué)分析.pdf

1、研究背景：
　　胃癌是我國最常見的惡性腫瘤之一，每年國內(nèi)胃癌新發(fā)病例數(shù)約占全球40％,其中90%以上是進(jìn)展期胃癌，5年生存率只有30*V43%，而早期胃癌的五年生存率可達(dá)90%以上。因此，如何早期發(fā)現(xiàn)胃癌以及尋找一種特異且有效的胃癌血清標(biāo)志物已成為目前研究熱點(diǎn)。
　　蛋白芯片是一種高通量的蛋白監(jiān)測(cè)系統(tǒng)技術(shù),可以一次性的檢測(cè)得到包括可溶性受體、趨化因子、生長抑制因子、常規(guī)腫瘤標(biāo)志物、炎癥因子、細(xì)胞黏附分子、血管生成與抑制因子等

2、多種涉及信號(hào)轉(zhuǎn)化、傳導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞結(jié)構(gòu)、細(xì)胞凋亡等廣泛領(lǐng)域的人類蛋白質(zhì)及多肽。蛋白芯片目前在尋找腫瘤標(biāo)志物、新藥研發(fā)、藥物療效觀察及發(fā)病原因的探索等方面體現(xiàn)出較廣泛的應(yīng)用價(jià)值。
　　研究目的：
　　選用高通量的蛋白質(zhì)芯片對(duì)早期胃癌患者與正常健康對(duì)照的血清標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè),比對(duì)兩者之間的差異蛋白譜，以期從中能篩選出有臨床意義的腫瘤標(biāo)志物，為早期胃癌的篩查、診斷以及個(gè)性化治療打下理論基礎(chǔ)。
　　研究方法：
　　1

3、.從我院胃腸外科2013年1月到2013年6月收治的早期胃癌患者中隨機(jī)選取3例患者作為病例組，從我院體檢中心隨機(jī)篩選3例正常健康成人為正常對(duì)照組。
　　2選用Raybiotech公司的AAH-BLG-1000蛋白芯片對(duì)早期胃癌組和正常對(duì)照組的血清標(biāo)本分別檢測(cè)以篩選早期胃癌患者血清腫瘤標(biāo)^志物。
　　3.利用PATHER,GO分析等生物信息學(xué)軟件對(duì)所篩選出的差異蛋白進(jìn)行生物學(xué)分析。
　　研究結(jié)果：
　　1.與正常對(duì)

4、照組比較，在早期胃癌組血清中發(fā)現(xiàn)10種蛋白質(zhì)表達(dá)上調(diào)，包括Mubrn B，PGRP-S，TLR3，TNFRSF12，Acrp30，beta-Catenin，CCR7，beta-Defensin2，Vitronectin，XEDAR，HVEM；
　　2與正常對(duì)照組比較，在早期胃癌組血中52種蛋白質(zhì)表達(dá)下調(diào)，包括CD40LJCAM4 Lymphotoxin beta R,MCP-2，PLUNC，VEGI，Smad7，CD163，GDF

5、3,LIGHT，Neurturin等。
　　3.對(duì)差異蛋白質(zhì)進(jìn)行一系列的生物信息學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)差異蛋白質(zhì)集中于血管生成、免疫過程、凋亡等生物進(jìn)程,下調(diào)蛋白質(zhì)在轉(zhuǎn)錄水平主要富集于4個(gè) miRNA:分別為HSA-MIR-520G.4、HSA-MIR-106B.4、HSA-MIR-20A.4和HSA-MIR-93.4。揭示了TGF-beta信號(hào)通路、趨化因子信號(hào)通路、細(xì)胞因子作用通路與早期胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)
　　研究結(jié)論：

6、>　　1.應(yīng)用高通量的蛋白芯片技術(shù)在早期胃癌患者血清中發(fā)現(xiàn)62種有顯著意義的差異表達(dá)蛋白，其中10種蛋白表達(dá)上調(diào)，52種蛋白表達(dá)下調(diào)，而VEGI、CD40L、SMAD7、PLUNC、LTpR，HEVM和Fn14這7個(gè)差異蛋白的特征性改變有望成為早期胃癌血清學(xué)的腫瘤標(biāo)志物。
　　2.生物信息學(xué)分析顯示這些差異蛋白與刺激反應(yīng)、免疫過程、腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡及血管生成等過程密切相關(guān)。
　　3.對(duì)于蛋白信號(hào)通路、轉(zhuǎn)錄水平以及基因相互作