2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、研究背景和目的:
  胃癌的侵潤(rùn)和轉(zhuǎn)移是胃癌致死和復(fù)發(fā)率居高不下的關(guān)鍵因素,近期研究發(fā)現(xiàn),胃癌中腫瘤起始細(xì)胞標(biāo)志物 CD133的表達(dá)與胃癌的侵潤(rùn)轉(zhuǎn)移相關(guān),在血液中檢測(cè)CD133的表達(dá)可預(yù)測(cè)腫瘤復(fù)發(fā)。SDF-1α/CXCR4軸對(duì)多種腫瘤有調(diào)控作用,其對(duì)胃癌也有上調(diào)多種基因的表達(dá)。
  我們前期研究表明,胃癌標(biāo)本中,CXCR4和CD133表達(dá)有相關(guān)性,且兩者都與與腫瘤的侵潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率呈正相關(guān)。提示 SDF-1α/CXCR

2、4軸對(duì)胃癌中CD133表達(dá)有調(diào)控作用,但是具體分子生物學(xué)機(jī)制未有報(bào)道,本課題將在前期實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步篩選和探討SDF-1α/CXCR4軸下游和CD133上游間的信號(hào)通路,以期闡明SDF-1α/CXCR4軸對(duì)胃癌CD133表達(dá)分子信號(hào)機(jī)制。
  研究方法:
  正常條件下培養(yǎng)人胃癌 KATO-Ⅲ細(xì)胞,免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)胃癌 KATO-III細(xì)胞系中CXCR4、Akt、p-Akt及CD133的表達(dá)。
  應(yīng)用含 SD

3、F-1α培養(yǎng)液,作用于細(xì)胞,采用半定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)KATO-Ⅲ中CD133mRNA和蛋白的表達(dá)。
  篩選出合適濃度的CXCR4特異性抑制劑AMD3100預(yù)處理KATO-Ⅲ細(xì)胞,然后再用SDF-1α刺激已預(yù)處理的細(xì)胞,收集細(xì)胞,采用RT-PCR和Western blot法檢測(cè)CXCR4、CD133的表達(dá)。了解SDF-1α/CXCR4軸對(duì)CD133表達(dá)的影響。

4、r>  篩選出合適濃度的PI3K特異性抑制劑 LY294002預(yù)處理 KATO-Ⅲ細(xì)胞,然后再用SDF-1α刺激已預(yù)處理的細(xì)胞,收集細(xì)胞,采用RT-PCR和Western blot法檢測(cè)CXCR4、Akt、p-Akt、CD133的表達(dá)。探索SDF-1α/CXCR4軸對(duì)CD133的調(diào)控是否是通過(guò)Akt信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
  研究結(jié)果:
  1.免疫細(xì)胞化學(xué)染色證實(shí)胃癌KATO-Ⅲ細(xì)胞呈CXCR4、Akt、p-Akt及CD133

5、陽(yáng)性表達(dá)。
  2. SDF-1α激活CXCR4下游PI3K/Akt信號(hào)通路,SDF-1α可誘導(dǎo)Akt磷酸化,即p-Akt增高。但總Akt表達(dá)未見(jiàn)明顯改變,同時(shí)使得CD133表達(dá)增高,但CXCR4無(wú)明顯變化。
  3. CXCR4特異性抑制劑AMD3100可有效地降低p-Akt水平,表明p-Akt水平上升SDF-1α/CXCR4軸激活引起的,同時(shí)使得CD133表達(dá)下降,據(jù)此可推測(cè)CD133的表達(dá)也是通過(guò)這條信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)

6、的。
  4.以PI3K特異性抑制劑LY294002處理KATO-Ⅲ細(xì)胞后,結(jié)果發(fā)現(xiàn),LY294002處理能顯著抑制SDF-1α引起的Akt活化,即p-Akt明顯被抑制。同時(shí)CD133的表達(dá)也降低。據(jù)此推測(cè)CD133的表達(dá)很有可能是通過(guò)SDF-1α/CXCR4-PI3K/Akt-CD133這條信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)的。
  研究結(jié)論:
  1.胃癌KATO-III細(xì)胞中CXCR4、Akt、p-Akt及CD133免疫細(xì)胞化學(xué)

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