腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD133在胃癌中表達(dá)的研究.pdf

1、胃癌是世界范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤之一,占惡性腫瘤死亡原因的第二位,其發(fā)生發(fā)展機(jī)制仍不清楚,腫瘤干細(xì)胞理論為腫瘤的起源提出了全新的闡釋,腫瘤組織中存在極少量的細(xì)胞充當(dāng)干細(xì)胞角色,它們具有自我更新和多向分化潛能,腫瘤干細(xì)胞是惡性腫瘤的根源,其含量可能與腫瘤的惡性程度及預(yù)后存在相關(guān)性。CD133盡管其生物學(xué)功能還不清楚,但目前已經(jīng)是一個(gè)最有價(jià)值的腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物,研究發(fā)現(xiàn)CD133+腫瘤細(xì)胞與腫瘤發(fā)生、侵襲、轉(zhuǎn)移、耐藥及復(fù)發(fā)有著密切的關(guān)系,因

2、此深入了解CD133+腫瘤細(xì)胞的分子生物學(xué)特性對(duì)尋求有效的抗癌治療,特別是靶向腫瘤干細(xì)胞的治療是相當(dāng)必要的。CD133在腦腫瘤、白血病、前列腺癌、結(jié)腸癌、肝癌、胰腺癌、非小細(xì)胞肺癌中相繼報(bào)道,而在胃癌中鮮見報(bào)道。我們將新鮮人胃癌組織標(biāo)本接種于免疫缺陷小鼠皮下和腎包膜下,建立人胃癌免疫缺陷小鼠移植模型,用免疫組織化學(xué)方法(IHC)檢測腫瘤組織中腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD133的表達(dá)情況,然后應(yīng)用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(RT-PCR)和免疫

3、組織化學(xué)技術(shù)檢測CD133 mRNA和蛋白在38例臨床人胃癌標(biāo)本中的表達(dá)情況,了解其表達(dá)譜,并分析其與臨床病理參數(shù)的關(guān)系,以探討其生物學(xué)意義。 第一部分：人胃癌免疫缺陷小鼠移植模型的建立及CD133的表達(dá) 目的：建立人胃癌免疫缺陷小鼠皮下和腎包膜下移植模型,探討腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD133的表達(dá)情況。方法：用2例新鮮人胃癌肝轉(zhuǎn)移組織標(biāo)本進(jìn)行免疫缺陷小鼠皮下和腎包膜下移植,比較8周后皮下和腎包膜下2組移植瘤的生長情況及成瘤率

4、,用免疫組織化學(xué)方法檢測人胃癌及移植瘤組織中腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD133的表達(dá)情況。結(jié)果：皮下和腎包膜下移植成瘤率分別為50％(5/10)和90％(9/10),2組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但2組移植瘤的生長方式有差異。移植瘤與人胃癌組織的病理形態(tài)學(xué)相似,免疫組化檢測CD133蛋白在人胃癌及移植瘤組織中表達(dá)陽性率為2.4％～8.5％,表現(xiàn)為灶狀陽性,人胃癌組織與移植瘤組織之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論：人胃癌及其移植瘤

5、組織中腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD133均有少許表達(dá),表達(dá)形式符合腫瘤干細(xì)胞特征,可能與胃癌的致瘤有關(guān)。 第二部分:CD133在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義 目的：探討CD133在胃癌組織中的表達(dá)及其臨床意義。方法：采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)檢測38例手術(shù)切除的胃癌原發(fā)組織、癌旁正常胃粘膜組織和其中8例肝轉(zhuǎn)移灶組織中CD133 mRNA的表達(dá),免疫組織化學(xué)方法檢測原發(fā)組織和轉(zhuǎn)移灶組織中CD133蛋白的表達(dá)情況,分析CD133的表達(dá)

6、與臨床病理參數(shù)的關(guān)系。結(jié)果：胃癌癌旁、原發(fā)、轉(zhuǎn)移組織中CD133 mRNA表達(dá)的灰度相對(duì)值分別為0.189±0.149、0.305±0.118和0.359±0.139,癌旁組與原發(fā)組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),原發(fā)組與轉(zhuǎn)移組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。免疫組化檢測腫瘤組織中CD133蛋白少許表達(dá),陽性細(xì)胞稀少。胃癌原發(fā)組織中CD133 mRNA的表達(dá)水平與腫瘤大小和Ki-67表達(dá)相關(guān)(P<0.05),與性別、年齡、浸