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1、丙酸作為一種重要的“C3”平臺(tái)化合物,其市場(chǎng)和應(yīng)用處于不斷拓展的狀態(tài),而現(xiàn)今石油資源的短缺及人類生存對(duì)環(huán)境、經(jīng)濟(jì)可持續(xù)發(fā)展的要求,生物法制備丙酸正成為當(dāng)今研究的熱點(diǎn)。目前,生物法生產(chǎn)丙酸仍然存在較多問題,如生產(chǎn)效率過低,產(chǎn)物抑制嚴(yán)重,產(chǎn)物分離困難等,嚴(yán)重制約了生物法丙酸的工業(yè)化。本論文主要就培養(yǎng)基優(yōu)化、發(fā)酵液膜法預(yù)處理和產(chǎn)物萃取分離等方面進(jìn)行了相關(guān)研究,具體如下:
通過氮源篩選、Plackett-Burman實(shí)驗(yàn)以及中心復(fù)
2、合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),最終確定最優(yōu)培養(yǎng)基配方(g/L):酵母膏13,蛋白胨8,KH2PO41,MnSO4.0.06,Na2HPO40.5,CoCl20.02。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)得到實(shí)際丙酸產(chǎn)量14.30 g/L,產(chǎn)量提高19.20%。此外,在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的外源丙酸、乙酸和琥珀酸發(fā)現(xiàn)Propionibacteriumfreudenreichii CCTCC M207015發(fā)酵產(chǎn)丙酸過程受到丙、乙酸的抑制,且受丙酸的抑制程度更強(qiáng);外源琥珀酸的加入對(duì)丙
3、酸的生產(chǎn)起到了一定的促進(jìn)作用。
對(duì)不同中空纖維膜組件預(yù)處理丙酸發(fā)酵液進(jìn)行了篩選和優(yōu)化。結(jié)果表明:采用0.1μm的聚偏氟乙烯(PVDF)材質(zhì)的微濾膜,在初始?jí)翰?.04 MPa、初始發(fā)酵液菌體濃度小于0.4、pH值6.0左右以及溫度30℃條件下能夠較好的實(shí)現(xiàn)丙酸發(fā)酵液的預(yù)處理。
比較離子交換法和絡(luò)合萃取法對(duì)丙酸發(fā)酵液的分離情況,后者具有高效性和高選擇性。萃取劑、稀釋劑篩選結(jié)果表明:選用甲基三辛基氯化銨為萃取劑,
4、正辛醇為稀釋劑時(shí)萃取過程受pH和無機(jī)陰離子影響較小,對(duì)丙酸具有較高的選擇性。以1.2 mol/L甲基三辛基氯化銨為有機(jī)相,有機(jī)相/水相(v/v)為3的條件下,萃取15 min即能達(dá)到平衡;該系統(tǒng)適用于較高濃度丙酸發(fā)酵液的萃取,經(jīng)4級(jí)萃取丙酸萃取率達(dá)86.2%;利用3 mol/LNaCl為反萃取劑,有機(jī)相/水相(v/v)比為1:4時(shí)反萃取效果較好,疲勞實(shí)驗(yàn)證實(shí)再生后的萃取劑仍具有較好的萃取能力。
本研究對(duì)丙酸發(fā)酵液的分離和反
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