組蛋白去乙?；敢种苿谒亓黾毎飳W行為的調控及機制研究.pdf

1、惡性黑素瘤是惡性程度最高的皮膚腫瘤，臨床上迫切需要新型的治療策略。組蛋白去乙?；敢种苿┦且环N極具前景的新型抗腫瘤藥物，其作用機制和抗腫瘤作用仍在研究中。本研究用經典組蛋白去乙?；?HDAC)抑制劑曲古抑菌素A(TSA)研究組蛋白乙?；瘜盒院谒亓龌虮磉_和細胞周期、凋亡及侵襲性的影響，并以其為對照，首次研究我國研發(fā)的第一個組蛋白去乙?；敢种苿┪鬟_本胺對黑素瘤細胞的影響，并探討其作用機制。 ①HDAC1和HDAC2在黑素瘤組

2、織中的表達。經免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)，HDAC1、HDAC2在皮膚黑素瘤組織中的表達明顯增加，與良性色素痣組織對比，有顯著性差異。 ②西達本胺和曲古抑菌素A對黑素瘤A375細胞生長的影響。經MTT、流式細胞術檢測發(fā)現(xiàn)，不同濃度西達本胺和曲古抑菌素A干預后，A375細胞增殖明顯受抑，凋亡增加，并分別出現(xiàn)G0/G1期阻滯和G2/M期阻滯。在一定的時間和濃度范圍內，藥物抑制增殖作用呈時效和量效關系。西達本胺和曲古抑菌素A作用48h的IC50

3、分別為250μmol/L和0.7μmol/L。經RT-PCR檢測，西達本胺干預24h后細胞周期蛋白p21WAF1/CIP1mRNA表達增加。 ③黑素瘤A375細胞組蛋白乙?；癄顩r及西達本胺對其影響。經過RT-PCR、蛋白印記法檢測，西達本胺干預后HDAC1在轉錄水平和蛋白水平表達增加，HDAC2表達無明顯變化。染色質總乙酰化組蛋白H3、H4水平增加。染色質免疫沉淀法結合實時定量PCR法發(fā)現(xiàn)p21WAF1/CIP1啟動子區(qū)組蛋白乙

4、酰化水平增加。 ④曲古抑菌素A對黑素瘤A375細胞侵襲能力的影響。經重組基底膜侵襲實驗、趨化運動試驗、細胞黏附實驗及明膠酶譜法檢測表明，TSA能減弱A375細胞和基底膜的體外黏附能力，抑制明膠酶MMP—2的活性，并在轉錄水平下調VEGF的表達，但是明顯增強A375細胞的體外趨化運動能力。TSA對A375細胞的侵襲性沒有明顯抑制。 研究表明：組蛋白乙?；赡軈⑴c了黑素瘤的發(fā)生、發(fā)展，并可能為黑素瘤的表觀遺傳學發(fā)生機制之一。