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文檔簡介
1、目的:研究組蛋白去乙酰化酶抑制劑丁酸鈉(Sodium Butyrate,NaB)對體外培養(yǎng)的人小細胞肺癌細胞株H446的增殖抑制及誘導(dǎo)凋亡作用,觀察丁酸鈉對小細胞肺癌裸鼠皮下移植瘤生長的抑制作用,探討其中可能的分子機制。 方法:①人小細胞肺癌細胞H446用含10%胎牛血清的1640培養(yǎng)基置37℃,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng),細胞分為對照組和不同濃度丁酸鈉處理組。MTT比色法測定丁酸鈉對H446細胞增殖的抑制情況;流式細胞分析術(shù)(FCM
2、)分析凋亡率和細胞周期的變化;RT-PCR方法檢測處理前后H446細胞中p21 WAF1 mRNA的表達變化;②將人小細胞肺癌細胞H446接種于12只裸鼠皮下,建立小細胞肺癌移植瘤模型,裸鼠分為治療組和對照組,每組6只,分別給予2.2 mg/g 丁酸鈉和磷酸鹽緩沖液(PBS)治療4周。治療過程中定期測量腫瘤大小及裸鼠體質(zhì)量,于治療結(jié)束時取腫瘤組織切片進行光鏡、電鏡觀察,TUNEL標記檢測凋亡率;取心、肝、腎等組織切片HE染色,組織學(xué)觀察
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