長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)海馬神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)的全局動(dòng)力學(xué)特性與調(diào)控研究.pdf

1、理解并揭示大腦運(yùn)作的模式是神經(jīng)科學(xué)的基本研究目標(biāo)。大腦運(yùn)作過(guò)程中的重要特性和表征之一是神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)自發(fā)涌現(xiàn)出的網(wǎng)絡(luò)放電模式，深入研究該自發(fā)活動(dòng)隱含的動(dòng)力學(xué)機(jī)制將有助于探索并最終闡明神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)信息傳輸、存儲(chǔ)與處理過(guò)程的內(nèi)在規(guī)律。圍繞神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)體外發(fā)育過(guò)程中動(dòng)力學(xué)特征與調(diào)控規(guī)律問(wèn)題，本文利用多電極陣列上離散培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)，在網(wǎng)絡(luò)介觀的尺度上開(kāi)展了多位點(diǎn)的長(zhǎng)時(shí)間同步記錄，對(duì)網(wǎng)絡(luò)全局動(dòng)力學(xué)特征隨發(fā)育的演化規(guī)律以及在藥物及電刺激操縱下的調(diào)控規(guī)律

2、進(jìn)行了初步探索。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)論如下：
　　（1）設(shè)計(jì)并實(shí)現(xiàn)了一套針對(duì)多通道神經(jīng)電生理實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的控制軟件與海量放電活動(dòng)數(shù)據(jù)的分析工具，改進(jìn)了基于多電極陣列培養(yǎng)皿的大鼠海馬離散神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)原代培養(yǎng)方法和記錄環(huán)境穩(wěn)定維持系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)了長(zhǎng)時(shí)間體外發(fā)育過(guò)程中神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)放電活動(dòng)數(shù)據(jù)的平穩(wěn)記錄（最長(zhǎng)可達(dá)18個(gè)月），為神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)活動(dòng)的動(dòng)力學(xué)機(jī)制研究提供了穩(wěn)定可靠的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。
　?。?）完整地跟蹤并記錄了23組長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)（100至150天）神經(jīng)

3、元網(wǎng)絡(luò)的體外發(fā)育過(guò)程，并針對(duì)長(zhǎng)時(shí)間發(fā)育活動(dòng)數(shù)據(jù)提出了一種對(duì)網(wǎng)絡(luò)放電活動(dòng)模式全局動(dòng)力學(xué)狀態(tài)的分析方法。首次報(bào)道了網(wǎng)絡(luò)發(fā)育過(guò)程中涌現(xiàn)的亞穩(wěn)定轉(zhuǎn)換軌跡。結(jié)合臨界雪崩分析方法和網(wǎng)絡(luò)功能拓?fù)涞牧炕笜?biāo)，發(fā)現(xiàn)該亞穩(wěn)定發(fā)育軌跡的出現(xiàn)與自組織臨界性密切相關(guān)，這一結(jié)果提示發(fā)育過(guò)程中網(wǎng)絡(luò)的自組織臨界特性可引導(dǎo)自發(fā)放電活動(dòng)進(jìn)入連續(xù)的瞬態(tài)調(diào)控轉(zhuǎn)換過(guò)程。并且，僅有在發(fā)育早期即表征出自組織臨界特性的網(wǎng)絡(luò)樣本，才可穩(wěn)定維持這種亞穩(wěn)定的發(fā)育軌跡?；谂囵B(yǎng)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)體外發(fā)

4、育的完整過(guò)程，該結(jié)果首次為復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)自組織臨界特性和亞穩(wěn)定動(dòng)力學(xué)特性間的重要關(guān)聯(lián)提供了實(shí)驗(yàn)證據(jù)。
　?。?）針對(duì)網(wǎng)絡(luò)內(nèi)藥物調(diào)控的急、慢性效應(yīng)進(jìn)行研究。使用經(jīng)典的神經(jīng)活動(dòng)評(píng)價(jià)指標(biāo)結(jié)合網(wǎng)絡(luò)簇發(fā)同步性分析、功能拓?fù)浞治龊蜕缛悍治龈櫡治鲂链己丸F作用下網(wǎng)絡(luò)全局動(dòng)力學(xué)特性的改變。首次發(fā)現(xiàn)了辛醇持續(xù)作用下網(wǎng)絡(luò)自發(fā)活動(dòng)的自回復(fù)現(xiàn)象。辛醇自回復(fù)結(jié)果提示了網(wǎng)絡(luò)自發(fā)活動(dòng)產(chǎn)生和維持過(guò)程中的穩(wěn)態(tài)可塑性機(jī)制。高濃度鐵作用的慢性積累效應(yīng)展示了鐵過(guò)量攝入對(duì)網(wǎng)絡(luò)功

5、能連接社群結(jié)構(gòu)的融合作用和鐵缺乏所造成的社群解離作用，初步揭示了功能連接結(jié)構(gòu)與動(dòng)力學(xué)特征的緊密關(guān)聯(lián)。
　　（4）針對(duì)刺激模式對(duì)網(wǎng)絡(luò)全局特征的調(diào)控規(guī)律進(jìn)行研究。通過(guò)對(duì)比分析刺激前后的網(wǎng)絡(luò)自發(fā)活動(dòng)狀態(tài)，結(jié)果顯示常用的隨機(jī)亂序刺激模式雖然顯著抑制了網(wǎng)絡(luò)內(nèi)的密集放電，其作用前后的網(wǎng)絡(luò)全局動(dòng)力學(xué)狀態(tài)卻無(wú)明顯變化；同時(shí)順序雙點(diǎn)閉環(huán)刺激雖僅作用于網(wǎng)絡(luò)內(nèi)指定兩節(jié)點(diǎn)并顯著增強(qiáng)了兩者間的關(guān)聯(lián)響應(yīng)，然而其作用后網(wǎng)絡(luò)內(nèi)放電模式狀態(tài)出現(xiàn)了融合。這一結(jié)果提示