版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、背景介紹與研究目的:
炎癥反應在機體內的部分心血管疾病及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)展及轉歸過程中發(fā)揮著重要作用,包括T細胞,B細胞及大多數(shù)巨噬細胞在內的白細胞均可遷移到病變部位并聚集。通常評價這些疾病的炎癥反應需要組織學檢查,但這種檢查只能觀察到病變部位炎癥存在的靜止情況,不能動態(tài)的觀察炎癥細胞遷移到病變部位的過程,而且具有創(chuàng)傷性。如果能實時并非創(chuàng)性觀察這些疾病的炎癥反應,則對疾病的治療及預后有重要意義。近年來分子影像的迅速發(fā)展使其
2、成為可能。通過超順磁性氧化鐵(SPIO)對巨噬細胞進行標記,從而示蹤其在體內的遷移及分布,能夠動態(tài)非創(chuàng)性的評價體內的炎癥反應。當SPIO通過靜脈注入體內后,隨血液在人體內循環(huán)。在體內SPIO主要通過肝臟的網(wǎng)狀內皮系統(tǒng)和血液中的吞噬細胞攝取清除,當SPIO被血液中的吞噬細胞攝取后,并不能再從細胞內排出,這樣便對吞噬細胞進行了標記,而標記的吞噬細胞可以游走到炎癥所在部位并聚集,在磁共振掃描時,會造成炎癥所在部位的T2弛豫時間縮短,從而在磁共
3、振圖像上顯示為信號降低。一般來講,SPIO主要是由內核及包被材料兩部分構成,納米顆粒內徑從十幾納米到幾百納米。內核由Fe3O4和/或γFe2O3構成,包被材料的種類很多,包被材料的存在提高了SPIO的穩(wěn)定性及生物相容性,而且有包被材料的存在,還可以便于對SPIO進行進一步的修飾,從而能夠使SPIO具有靶向性或特異性。到目前為止,已有很多學者利用SPIO來標記被活化的或沒有被活化的巨噬細胞,并對體內炎癥反應進行評價。這些研究都充分說明利用
4、SPIO標記巨噬細胞對體內炎癥反應進行評價具有很大優(yōu)勢。雖然如此,由于SPIO包被材料和內徑存在很大差異性,在這些研究中所利用的SPIO的包被材料及內徑大小均不相同,所以得到的結果可比性較差。如果能定義一種最佳的SPIO用來標記巨噬細胞,不僅標記效率高,而且生物相容性高,則對進一步的研究有重要意義。但這方面的研究還很少。在本研究中,我們在體外比較了檸檬酸和葡聚糖包被的SPIO對小鼠巨噬細胞的標記效率的不同,并對標記后細胞功能的變化及磁共
5、振成像效應進行了評價。從而嘗試了解哪種SPIO更適于標記巨噬細胞,為進一步的生物應用提供試驗基礎。
材料和方法:
按照共沉淀法合成檸檬酸及葡聚糖包被的SPIO。分離6周齡左右的雌性ICR小鼠腹腔巨噬細胞。在巨噬細胞與濃度為0.25mg/ml SPIO共同孵育1小時后,通過普魯士藍染色對兩種材料包被的SPIO標記巨噬細胞的效率進行觀察。濃度分別為0.1、0.25、0.5、0.75、1.0mg/ml的SPIO對巨
6、噬細胞進行標記后,采用Calcein-AM法對不同濃度的SPIO標記后的巨噬細胞活性進行評價。巨噬細胞與濃度為0.5mg/ml的SPIO共同孵育1小時后,通過細胞劃痕試驗對細胞的遷移能力的變化進行觀察,用imageJ進行像素分析來評價細胞遷移能力的變化。巨噬細胞與濃度為0.5mg/ml的SPIO共同孵育1小時后,通過酶聯(lián)標記法測定標記細胞促炎癥因子IL6的24小時分泌量。0.1、0.25、0.5、0.75、1.0mg/ml四種濃度的SP
7、IO與巨噬細胞共同孵育1小時后,用0.5%瓊脂凝膠固定于96孔板,在PHILIPS3.0T磁共振全身掃描儀上進行掃描,對不同孵育濃度時弛豫時間的變化進行評價。SPIO孵育濃度對細胞弛豫時間及細胞活性的影響用雙向方差分析,然后進行多重比較分析。SPIO對細胞遷移能力及促炎癥因子的分泌量的影響通過studentt檢驗進行。
結果:
利用經(jīng)典共沉淀法合成的SPIO為棕黑色膠狀液體,檸檬酸包被的SPIO水合內徑約10
8、0nm,檸檬酸包被的SPIO水合內徑約150nm,納米粒度分布較好.4℃保存SPIO穩(wěn)定性好。普魯士藍染色結果顯示未與SPIO共同孵育的巨噬細胞被染成均質紅色,而與SPIO共同孵育1小時后的巨噬細胞質內出現(xiàn)藍色鐵顆粒,檸檬酸包被的SPIO明顯比葡聚糖包被的SPIO更易進入到細胞內,即標記效率高。細胞的活性測定結果顯示細胞活性隨SPIO孵育濃度的增加而降低,當SPIO孵育濃度為0.25mg/ml起,兩種材料包被的SPIO對細胞均存在毒性作
9、用。另外通過比較同種孵育濃度兩種包被材料的SPIO細胞活性,發(fā)現(xiàn)兩種包被材料的SPIO在相同的濃度時對巨噬細胞的影響無統(tǒng)計學意義。細胞遷移能力測定結果顯示兩種包被材料的SPIO標記的細胞的遷移能力無明顯變化,這便說明SPIO不會影響細胞的遷移能力。促炎癥因子分泌量測定結果顯示檸檬酸包被的SPIO標記的巨噬細胞促炎癥因子的分泌量增大而葡聚糖包被的SPIO標記的細胞則無增大。在磁共振掃描的結果中顯示檸檬酸包被的SPIO標記的巨噬細胞可以明顯
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 植物細胞包被系統(tǒng)酸性降解及生物學效應.pdf
- SPIO標記人內皮細胞的生物學特性及MR成像實驗研究.pdf
- SPIO標記大鼠骨髓間充質干細胞:生物學活性及體外MRI成像效應評價.pdf
- 系膜細胞活化模型的建立及其對單核巨噬細胞的生物學效應.pdf
- 缺氧對腫瘤相關巨噬細胞生物學特征的影響.pdf
- 磁共振引導高強度聚焦超聲生物學效應的實驗研究.pdf
- 血漿Exosomes生物學特征及血漿Exosomes對巨噬細胞功能影響的初步研究.pdf
- 磁共振彌散加權成像對胰腺癌生物學行為價值的研究.pdf
- 不同材料金屬烤瓷冠磁共振成像偽影的研究.pdf
- 納米TiO2對小鼠腹腔巨噬細胞的體外生物學效應研究.pdf
- 不同鋅源在仔豬上的生物學效應及對豬空腸上皮細胞損傷的影響.pdf
- IBRV對牛單核巨噬細胞生物學特性及主要細胞表面分子表達的影響.pdf
- 活化巨噬細胞對血管內皮細胞生物學特性及成血管作用的影響.pdf
- 基于功能磁共振成像的針刺效應研究.pdf
- SPIO對兩種干細胞生物學特性影響及利用磁靶向技術進行細胞遷移的初探.pdf
- 內毒素和地塞米松對大鼠肺泡巨噬細胞生物學特性的影響.pdf
- 聚乙烯亞胺包被的四氧化三鐵磁性納米顆粒對SHI-1細胞生物學特性的影響及體內初步成像.pdf
- 納米材料的生物學效應研究.pdf
- 空間環(huán)境不同因素對小麥的生物學效應研究.pdf
- 鈀銀合金對磁共振成像影響的初步研究.pdf
評論
0/150
提交評論