人胃癌細(xì)胞高侵襲亞系的篩選及其生物學(xué)特性的研究.pdf

1、南華大學(xué)碩士學(xué)位論文人胃癌細(xì)胞高侵襲亞系的篩選及其生物學(xué)特性的研究姓名：周志姣申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：朱建思200705014人胃癌細(xì)胞高侵襲亞系的篩選及其生物學(xué)特性的研究人胃癌細(xì)胞高侵襲亞系的篩選及其生物學(xué)特性的研究碩士研究生：周志姣導(dǎo)師：朱建思教授中文摘要目的目的采用Transwell小室篩選胃癌細(xì)胞高侵襲亞系并研究其生物學(xué)特性。旨在進(jìn)一步探討胃癌侵襲、轉(zhuǎn)移機(jī)制。方法方法利用Transwell小室篩選高侵

2、襲力胃癌細(xì)胞亞系。并通過HE染色觀察母亞兩系細(xì)胞形態(tài)；Westernblot檢測兩系細(xì)胞Ecadherin和TIMP1蛋白變化并對(duì)各條帶進(jìn)行灰度分析；Transwell檢測細(xì)胞遷移能力變化；用免疫組化SABC法觀察母亞兩系細(xì)胞NM23H1蛋白表達(dá)情況并對(duì)其結(jié)果進(jìn)行定性、定位及圖象分析；流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期以及繪制細(xì)胞生長曲線。結(jié)果結(jié)果利用Transwell小室反復(fù)篩選十次，從MKN28細(xì)胞中篩選出高侵襲力胃癌細(xì)胞亞系MKN28S10。

3、母亞兩系細(xì)胞形態(tài)上無明顯差異，細(xì)胞均呈多邊形，大小不均，核漿比大，核圓形、橢圓形；但亞系中Ecadherin、TIMP1蛋白表達(dá)同母系相比顯著降低MKN28S10中E–cadherin蛋白表達(dá)的相對(duì)灰度值為0.420.03，較MKN28細(xì)胞（相對(duì)灰度值為0.900.04）明顯降低（P＜0.05）而MKN28S10的TIMP1蛋白表達(dá)的相對(duì)灰度值（0.520..06）較MKN28的TIMP1蛋白表達(dá)(0.890.05）明顯降低（P＜0.0

4、5）免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示亞系中NM23H1的表達(dá)明顯低于母系(P0.05)亞系NM23H1的平均光密度（71.8118.81）較母系（127.1215.68）明顯降低（P0.05）；顯微鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù)示亞系遷移至膜背面的數(shù)量(100.250.50視野)較母系(61.752.06視野)明顯增多(P0.05)，細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力明顯增強(qiáng)；細(xì)胞周期檢測表明：MKN28S10細(xì)胞S期細(xì)胞比例為66.7%，高于MKN28細(xì)胞在此期的DNA相對(duì)含量。而且，