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1、目的:篩選建立具有不同轉(zhuǎn)移潛能高侵襲能力食管癌細(xì)胞株的亞系并研究其生物特性。
方法:利用Transwell侵襲小室從人食管鱗癌Eca-109細(xì)胞株中篩選出高侵襲能力食管癌細(xì)胞株亞系,通過(guò)HE染色比較兩系的細(xì)胞形態(tài);四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力的變化;流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)兩系的細(xì)胞周期;蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)與侵襲能力相關(guān)基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)蛋白表達(dá)。
2、 結(jié)果:用Transwell侵襲小室成功從食管癌細(xì)胞株Eca-109中篩選出高侵襲能力食管癌細(xì)胞株亞系,命名為 Eca-109 T4。兩系在細(xì)胞形態(tài)上沒(méi)有明顯差異;MTT法檢測(cè)顯示亞系Eca-109 T4增殖能力強(qiáng);細(xì)胞周期顯示亞系增殖指數(shù)(Proliferation Index,PI)高,PI=41%;且MMP-2蛋白表達(dá)相比增高(P=0.023, P<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;TIMP-2蛋白表達(dá)相比增高,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=
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