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文檔簡介
1、研究目的:本課題通過脂多糖(LPS)干預(yù)人內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs),建立細(xì)胞水平膿毒癥模型,觀察細(xì)菌脂多糖(LPS)對人EPCs增殖、黏附功能的影響及不同濃度血必凈注射液對其干預(yù)作用。以期在細(xì)胞水平上檢測血必凈注射液注射液對膿毒癥的作用。
方法:1、從南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院實驗室購得由臍靜脈血提取的EPCs株系,經(jīng)復(fù)蘇、傳代、培養(yǎng)、鑒定。2、將等量EPCs接種到96孔培養(yǎng)板上,隨機(jī)分為4組:空白對照組、LPS(100ng
2、/ml)對照組、XBJ-1組(LPS孵育EPCs后不同濃度(5mg/ml、25mg/ml、50mg/ml)血必凈注射液干預(yù))、XBJ-2組(LPS聯(lián)合不同濃度(5mg/ml、25mg/ml、50mg/ml)血必凈注射液同時孵育EPCs)。3、光學(xué)相差顯微鏡觀察并用MTT比色法檢測4組EPCs黏附情況、增殖情況。4、用統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù),得出結(jié)論。
結(jié)果:EPCs生長良好,成短梭狀,相互交聯(lián),經(jīng)鑒定系實驗所需EPCs。EPC
3、s與LPS共孵育后其增殖能力顯著降低(P=0.000),加入血必凈注射液后其增殖OD值均有提高(P均<0.05),且呈劑量依賴關(guān)系。與對照組比較,EPCs黏附OD值在LPS作用后明顯降低(P=0.042),與血必凈注射液作用后,EPCs黏附能力較LPS組有改善,但朱見明顯劑量-效應(yīng)關(guān)系。
結(jié)論:本研究顯示單純LPS可導(dǎo)致EPCs增殖、黏附能力下降,血必凈注射液可使受損的EPCs的增殖、黏附能力改善,其中增殖能力隨血必凈注射
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