大鼠休克血清對(duì)培養(yǎng)的內(nèi)皮細(xì)胞NF-kB活化的影響及參附注射液的干預(yù)作用.pdf

1、目的：
　　 1．觀察失血性休克血清對(duì)培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞NF-κB活化的影響。
　　 2．參附注射液對(duì)其的干預(yù)作用（12h時(shí)間點(diǎn)）。
　　 方法：
　　 1．將30只健康SD大鼠隨機(jī)分為3組：正常對(duì)照組、假休克組、失血性休克組，每組10只。除對(duì)照組和假休克組外，其余大鼠均在15min內(nèi)放血致血壓達(dá)40mmHg維持60分鐘，即休克模型復(fù)制成功，各組均于3小時(shí)后取血。
　　 2．空白對(duì)照組采用10

2、％FBS+90％RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)：正常對(duì)照組采用10％正常對(duì)照組血清+90％RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)；失血性休克組將10％休克組血清+90％RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，然后將HUVEC接種于6孔培養(yǎng)板中，用上述各種不同培養(yǎng)液分別干預(yù)6h、12h和18h。通過(guò)蛋白免疫印跡法(Westernblotting)技術(shù)檢測(cè)刺激后人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞胞核NF-κBp65的表達(dá)。
　　 3．空白對(duì)照組采用10％FBS+90％RP

3、MI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)；正常對(duì)照組、假休克組、失血性休克組均采用10％各組血清+90％RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，失血性休克血清加參附注射液干預(yù)組培養(yǎng)細(xì)胞，參附注射液100ul/ml，先于休克血清1h加入。然后將HUVEC接種于6孔培養(yǎng)板中，用上述各種不同培養(yǎng)液干預(yù)12h。通過(guò)蛋白免疫印跡法(Westernblotting)技術(shù)檢測(cè)刺激后人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞胞核NF-κBp65的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1．與空白對(duì)照

4、組、正常對(duì)照組比較，休克組血清刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞12h、18h后，NF-κBp65表達(dá)升高，均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2．與空白對(duì)照組、正常對(duì)照組比較，休克組血清刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞6h后，NF-κBp65表達(dá)無(wú)明顯升高，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3．與休克組血清刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞18h比較，休克組血清刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞12h后，NF-κBp65表達(dá)升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

5、
　　 4．與空白對(duì)照組、正常對(duì)照組及假休克組比較，休克組血清刺激內(nèi)皮細(xì)胞12小時(shí)后，NF-κBp65表達(dá)升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 5．與空白對(duì)照組、正常對(duì)照組及假休克組比較，休克血清加參附干預(yù)組刺激內(nèi)皮細(xì)胞12小時(shí)后，NF-κBp65表達(dá)無(wú)明顯升高，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 6．與空白對(duì)照組、正常對(duì)照組相比，假休克組刺激12小時(shí)后，NF-κBp65表達(dá)無(wú)明顯升高，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P