血必凈注射液對脂多糖誘導(dǎo)大鼠腎臟微血管內(nèi)皮細胞組織因子表達的影響及機制探討.pdf

1、目的：
　　 本研究以體外培養(yǎng)的腎臟微血管內(nèi)皮細胞為模型，旨在觀察血必凈注射液對脂多糖誘導(dǎo)大鼠腎臟微血管內(nèi)皮組織因子表達的影響，并探討其可能的機制。
　　 方法：
　　 采用胰酶消化法原代培養(yǎng)大鼠腎臟微血管內(nèi)皮細胞，用Ⅷ因子相關(guān)抗原免疫熒光法鑒定。取生長良好的第3、4代細胞，分為對照組、脂多糖（LPS）刺激組和血必凈治療組。采用透射電鏡觀察各組細胞形態(tài)。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）法檢測細胞內(nèi)組織因子（

2、TF）和內(nèi)皮素（ET）mRNA表達，免疫熒光法檢測核因子KB（NF-KB）活化，流式細胞儀檢測細胞活性氧（ROS）的表達。
　　 結(jié)果：
　　 與對照組相比，電鏡下10mg/LLPS刺激組細胞粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體空泡變性明顯，LPS（1-100mg/L）刺激組TF和ETmRNA表達均顯著增加（P<0.05），10mg/LLPS刺激5分鐘時ROS明顯增加，刺激30分鐘ROS表達至峰值水平，NF-KB完全移位至細胞核內(nèi)；血必凈

3、（25mg/ml）治療組與LPS刺激組相比細胞形態(tài)明顯改善，TF和ETmRNA表達減少，差異顯著（P<0.05），ROS表達量降低，NF-KB活化減弱，差異顯著（P<0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.脂多糖誘導(dǎo)的大鼠RMEC損傷和功能下降表現(xiàn)在①細胞形態(tài)改變②粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體等細胞器發(fā)生空泡變性③上調(diào)ET、TFmRNA表達水平④增加ROS表達，激活NF-KB。
　　 2.血必凈注射液可以使脂多糖誘導(dǎo)的大鼠R