利用氣相脈動式固態(tài)發(fā)酵反應(yīng)器生產(chǎn)球孢白僵菌孢子粉的中試研究.pdf

1、西南大學(xué)碩士學(xué)位論文利用氣相脈動式固態(tài)發(fā)酵反應(yīng)器生產(chǎn)球孢白僵菌孢子粉的中試研究姓名：李尊華申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：微生物指導(dǎo)教師：張永軍20070601兩南大學(xué)碩士學(xué)位論文基質(zhì))提高了3534％。2利用水活度調(diào)節(jié)提高分生孢子質(zhì)量前期研究表明，在液體發(fā)酵過程中適當(dāng)降低培養(yǎng)基水活度，不僅改良了液體種子的生理狀態(tài)和提高了生物量積累，而且接種固體發(fā)酵后產(chǎn)生的分生孢子的數(shù)量和質(zhì)量也明顯提高。本研究進一步對上述發(fā)酵條件在液體發(fā)酵罐和氣相脈動式固態(tài)發(fā)

2、酵反應(yīng)器中進行了中試研究。結(jié)果表明，在液體發(fā)酵對數(shù)生長中期(發(fā)酵12br內(nèi))均勻調(diào)節(jié)水活度至O96，生物量最大值達到00166咖L，比對照(自然水活度下培養(yǎng))提高了161％。利用該液體種子接種固體培養(yǎng)基進行發(fā)酵，生物量積累比對照提高了66％，分生孢子產(chǎn)量比對照提高了86％，達到153110”個孢T／克干重基質(zhì)。對分生孢子質(zhì)量檢測表明，低水活度發(fā)酵來源的分生孢子萌發(fā)加快，萌發(fā)中時比對照縮短O57h耐熱性和耐紫外輻射能力明顯強于對照；貯藏性

3、能穩(wěn)定，4℃貯藏6個月后的存活率仍然為9533％；毒力明顯提高，在1x107個孢子／mL的劑量下對桃蚜的半致死時間(10283hr)比對照縮短了1447br。由此表明，利用水活度調(diào)節(jié)液體種子生理狀態(tài)，接種固體發(fā)酵生產(chǎn)高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)球孢白僵菌分生孢子在生產(chǎn)中是可行的。3干燥方式對球孢白僵菌分生孢子性能的影響固體發(fā)酵后的干燥方式是影響生產(chǎn)周期、分生孢予收集和高孢粉質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)。本研究以分生孢子含水量、雜菌率、活力、抗逆性和毒力為指標(biāo)優(yōu)化了干燥

4、條件。結(jié)果表明，在35℃下連續(xù)干燥5hr，分生孢子含水量由2307％降低到744％，分生孢子仍保持很高的活力，最終萌發(fā)率為9833％，萌發(fā)中時為96hi“，與新鮮分生孢子活力沒有明顯差異。高孢粉雜菌率僅為380％，符合真菌殺蟲劑雜菌率不能高于5％的質(zhì)量要求。干燥后的分生孢子耐熱和耐紫外輻射能力顯著高于新鮮孢子。生物測定表明，干燥處理后的分生孢子與新鮮分生孢子的毒力沒有明顯差異。因此，該干燥方式不僅縮短了干燥處理時間，而且具有雜菌率低、不

5、影響分生孢子的活力以及毒力等優(yōu)點，是一種比較理想的干燥方式。4光照調(diào)節(jié)球孢白僵菌產(chǎn)孢光照是影響真菌產(chǎn)孢的重要環(huán)境因子。為進一步優(yōu)化固體發(fā)酵條件，本研究分析了光照對球孢白僵菌分生孢子產(chǎn)生的影響。結(jié)果表明，在完全黑暗下，營養(yǎng)菌絲生長旺盛，產(chǎn)孢很少，但在連續(xù)光照條件下，菌絲分化產(chǎn)生分生孢子梗，并形成大量分生孢子。不同光質(zhì)對球孢白僵菌的分生孢子產(chǎn)生影響不同，盡管黃、綠、紅等單色光均可誘導(dǎo)分生孢子產(chǎn)生，但藍光最有利于產(chǎn)孢。對光響應(yīng)時間研究表明，只