CK20檢測(cè)大腸癌淋巴結(jié)微小轉(zhuǎn)移的免疫組織化學(xué)研究.pdf

1、要摘文中前言.細(xì)胞角蛋白20(cytokeratin20CK20)是近年來(lái)被確定的其表達(dá)絕大多數(shù)只限于胃和大腸上皮的一種多膚，當(dāng)正常表達(dá)CK20的上皮惡變時(shí)，這些癌往往也表達(dá)CK20，而且轉(zhuǎn)移癌與原發(fā)癌無(wú)異。CK20表達(dá)不被表現(xiàn)在內(nèi)皮和淋巴細(xì)胞或其他在正常淋巴結(jié)中可被發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞類型，我們可以利用它檢測(cè)大腸癌琳巴結(jié)微轉(zhuǎn)移，目前有關(guān)CK20用于檢測(cè)大腸癌淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的文獻(xiàn)不多，而且文獻(xiàn)大多從CK20基因表達(dá)方面深人研織化學(xué)方法對(duì)大腸癌淋巴結(jié)

2、微轉(zhuǎn)移情況進(jìn):們嘗試用免疫組七研究，探討CK20在腫瘤臨床中的應(yīng)用，為大腸癌轉(zhuǎn)移的早期診斷、明確病理分期提供理論依據(jù)。實(shí)驗(yàn)材料‘共檢淋巴結(jié)249枚，采自1998年9月至2000年7月于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院腫瘤科57例大腸癌根治術(shù)后標(biāo)本。其中男性32例，女性25例年齡29一88歲結(jié)腸癌26例，直腸癌31例DukesB期為48例，DukesC期為9例。所有標(biāo)本均經(jīng)系統(tǒng)病理檢查。病理資料按常規(guī)分類。鼠抗人單克隆抗細(xì)胞角蛋白20抗體、鼠兔S

3、一P超敏試劑盒、胰蛋白酶試劑盒、0.05%DAB均購(gòu)自福建邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司。實(shí)驗(yàn)方法每一標(biāo)本均經(jīng)10%福爾馬林液固定，石蠟包埋，并被重新制備成連續(xù)四張5pm切片，其中選取兩張用于常規(guī)病理組織學(xué)染色，另兩張用于免疫組織化學(xué)染色。病理組織學(xué)染色按常規(guī)HE轉(zhuǎn)移陽(yáng)性率在不同淋巴結(jié)數(shù)目之間存在顯著性差別(P0.01)在不同Dukes分期之間及不同大體形態(tài)之間也存在顯著性差別(P0.05)。討論盡管實(shí)施了原發(fā)腫瘤根治切除，仍有大約50%大腸癌患

4、者死于局部腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，而且其中20%一30%常規(guī)組織學(xué)檢查無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(DukesA&B期)的患者由于遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或局部復(fù)發(fā)于5年內(nèi)死亡。在大腸癌根治術(shù)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移中，其中一個(gè)原因?yàn)榱馨徒Y(jié)亞臨床灶轉(zhuǎn)移即淋巴結(jié)微小轉(zhuǎn)移，所謂淋巴結(jié)微小轉(zhuǎn)移是指常規(guī)病理檢查難以發(fā)現(xiàn)的小于2mm的轉(zhuǎn)移。幾種方法已經(jīng)被用于淋巴結(jié)微小轉(zhuǎn)移的檢測(cè)，免疫學(xué)方法和分子生物學(xué)技術(shù)已經(jīng)體現(xiàn)出其優(yōu)越性和臨床價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)技術(shù)應(yīng)用抗細(xì)胞角蛋白20(CK20)單克隆抗

5、體檢測(cè)大腸癌淋巴結(jié)微小轉(zhuǎn)移情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，免疫組織化學(xué)方法較常規(guī)組織學(xué)方法(HE染色)能檢測(cè)出常規(guī)組織學(xué)檢測(cè)遺漏的淋巴結(jié)微小轉(zhuǎn)移(7.7%)，提高了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的檢出率。在48例組織學(xué)未發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(DukesB期)標(biāo)本中，CK20免疫組織化學(xué)S一P法檢出其中8例存在淋巴結(jié)微小轉(zhuǎn)移(16.7%)，改變了臨床上對(duì)這8例大腸癌患者的病理分期(從DukesB期到真正的DukesC期)，因而提高了大腸癌臨床分期的準(zhǔn)確性，對(duì)判斷患者預(yù)后、指導(dǎo)