免疫組織化學(xué)講義(xin)

1、1組織學(xué)病理學(xué)技術(shù)與免疫組織化學(xué)課程組織學(xué)病理學(xué)技術(shù)與免疫組織化學(xué)課程任課教師：張雷學(xué)時數(shù)：20一光鏡組織病理切片技術(shù)(6學(xué)時)（1）取材注意事項及組織固定法（2）制片方法：石蠟切片、冰凍切片、鋪片、磨片（3）HE染色及特殊染色方法二組織化學(xué)技術(shù)（4學(xué)時）（1）固定與制片（2）蛋白質(zhì)、糖類、脂質(zhì)及核酸組織化學(xué)反應(yīng)（3）酶組織化學(xué)三免疫組織化學(xué)技術(shù)（10學(xué)時）（1）免疫學(xué)及免疫組織化學(xué)的原理和基本技術(shù)（2）常用免疫組織化學(xué)方法（3）免疫酶

2、組織化學(xué)技術(shù)（4）免疫電鏡技術(shù)（5）原位雜交組織化學(xué)（6）細胞凋亡的過程及相關(guān)因素（7）免疫組織化學(xué)結(jié)果判定及圖象分析（8）顯微照相第一章概論第一章概論病理學(xué)經(jīng)歷了大體器官病理學(xué)、細胞病理學(xué)、超微病理學(xué)、免疫病理學(xué)和分子病理學(xué)的發(fā)展階段，正在向21世紀的信息病理學(xué)前進。國際著名病理學(xué)家Karllennert教授有句名言：“技術(shù)是病理學(xué)之母”?；仡欉^去病理學(xué)的重大發(fā)展，無一不是新技術(shù)的發(fā)明與應(yīng)用的結(jié)果。正如程大民院士指出的那樣：“病理學(xué)的

3、理論和技術(shù)被視為一輛車的兩個車輪，缺一不可，互為依存，互相促進，兩者的結(jié)合決定著病理學(xué)的發(fā)展?！辈±韺W(xué)技術(shù)包括傳統(tǒng)病理學(xué)技術(shù)和現(xiàn)代新技術(shù)，傳統(tǒng)的fmalin固定，石蠟切片和HE染色技術(shù)仍然是病理學(xué)的基本技術(shù)，大量應(yīng)用于基礎(chǔ)和臨床病理學(xué)日常工作中，保證和提高常規(guī)技術(shù)質(zhì)量和現(xiàn)代設(shè)備水平十分重要。從傳統(tǒng)病理學(xué)發(fā)展的經(jīng)驗看，器官病理學(xué)、細胞病理學(xué)以及超微病理學(xué)基本都屬于形態(tài)學(xué)。免疫細胞化學(xué)雖然是形態(tài)、代謝及功能的三位一體的方法，也基本以形態(tài)為主

4、，反映一定代謝及功能狀態(tài)。特別在方法上與傳統(tǒng)病理學(xué)技術(shù)：包埋、制片、染3間質(zhì)成分，然后充分振蕩，制成的標本經(jīng)染色或不經(jīng)染色，即可觀察單個完整的細胞。2涂片標本：將骨髓、血液或脫落細胞涂于載玻片上，經(jīng)固定和染色制成的標本，用以觀察細胞形態(tài)及微細結(jié)構(gòu)。3壓片標本：將整體或小塊組織經(jīng)藥物處理及染色、撕碎壓平于載玻片上所制成的標本。4鋪片標本：將膜片狀組織；如大網(wǎng)膜，腸系膜或皮下疏松結(jié)蹄組織鋪于載玻片上，經(jīng)固定及染色等過程制成的標本。5磨片標本

5、：將堅硬的組織；如硬骨和牙，不經(jīng)脫鈣磨成薄片，經(jīng)染色或不經(jīng)染色制成的標本。6血管注射標本：將染色液，如卡紅明膠、普魯士藍、墨以單色或雙色注如血管內(nèi)，以觀察臟器的血管分布及內(nèi)皮細胞的表面形態(tài)。7組織印片：將未經(jīng)固定的新鮮組織小塊（如手術(shù)后或尸體解剖標本）壓印玻璃片上，經(jīng)固定后再行染色。第二節(jié)制片方法的程序一組織切片制作過程的各種操作1取材與固定取材是根據(jù)實驗?zāi)康暮鸵蠹安∽兂潭榷侠砣〉媒M織材料。固定是用化學(xué)藥品把組織原來的結(jié)構(gòu)保存下來以

6、便觀察研究之用，固定劑同時具有硬化組織的作用，使制片便于進行。2.脫水洗滌是把滲入組織中的固定劑洗去，防止染色中的結(jié)晶產(chǎn)生。脫水是驅(qū)除組織中的水分以便透明和浸臘。3.透明與浸臘脫水后的組織中水分以被透明劑所代替，而利于浸臘。浸蠟的目的是使組織有一定的硬度而利于切片和細胞組織保持一定的生活時狀態(tài)。4.包埋與切片用石蠟和其他包埋劑將組織包繞一定的形狀以便于切片。將包埋好的組織快用切片機切成一定厚度（以m計）。5.貼片（展片、撈片）和染色將已