乳腺癌前哨淋巴結(jié)與非前哨淋巴結(jié)微小轉(zhuǎn)移及免疫細(xì)胞的臨床研究.pdf

1、前哨淋巴結(jié)活檢(SentinelLymphNodeBiopsy,SLNB)技術(shù)在當(dāng)今乳腺癌治療中起重要作用。前哨淋巴結(jié)(SentielLymphNode，SLN)是首先接受原發(fā)腫瘤淋巴引流的淋巴結(jié)，也是最有可能發(fā)生轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)。它的臨床應(yīng)用使得選擇淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性患者行腋窩淋巴結(jié)清掃(AxillaryLymphNodesDissection，ALND)，而避免對(duì)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陰性患者行腋窩淋巴結(jié)清掃成為可能。對(duì)前哨淋巴結(jié)的詳細(xì)檢查，包括連續(xù)切

2、片，免疫組織化學(xué)染色，或基于PCR的分子生物學(xué)技術(shù)的檢測(cè)可發(fā)現(xiàn)相當(dāng)一部分為游離腫瘤細(xì)胞(IsolatedTumorCells，ITC)及微轉(zhuǎn)移(Micrometastasis，MIC)。這部分病人是否應(yīng)該行腋窩淋巴結(jié)清掃，還存在爭(zhēng)議。因此本研究將闡明是否有一些確定的參數(shù)壁如這些微小轉(zhuǎn)移病灶的大小或其在淋巴結(jié)中的解剖位置與下游非前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，這將為在前哨淋巴結(jié)出現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移病灶的情況下選擇腋窩淋巴結(jié)清掃提供依據(jù)(研究目的一)。

3、 而且SLN作為腫瘤抗原呈遞細(xì)胞與腫瘤引流淋巴系統(tǒng)首先接觸的淋巴結(jié)，SLNB為研究腫瘤引流淋巴系統(tǒng)提供一個(gè)理想模型?，F(xiàn)在的免疫學(xué)研究表明SLN在腫瘤引流淋巴結(jié)中起重要的免疫作用，其中包括重要的免疫監(jiān)控作用。對(duì)比非前哨淋巴結(jié)，前哨淋巴結(jié)主要表現(xiàn)在抗原呈遞細(xì)胞如樹突狀細(xì)胞發(fā)生改變。因此SLN可能是研究與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生相關(guān)的免疫學(xué)改變最適合的淋巴結(jié)。然而，轉(zhuǎn)移的出現(xiàn)對(duì)這些結(jié)果的影響還不清楚。本文進(jìn)一步比較研究乳腺癌前哨淋巴結(jié)不同轉(zhuǎn)移狀態(tài)前哨與

4、非前哨淋巴結(jié)的成熟樹突狀細(xì)胞的密度(研究目的二)。病人和方法研究對(duì)象來(lái)源于柏林RRK腫瘤外科醫(yī)院乳腺癌前哨淋巴結(jié)研究數(shù)據(jù)庫(kù)(1994年-2004年)。 49例前哨淋巴結(jié)出現(xiàn)游離腫瘤細(xì)胞或微轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者納入研究目的一。重新評(píng)估所有前哨淋巴結(jié)及非前哨淋巴結(jié)的病理染色切片以核實(shí)診斷，并記錄病灶在淋巴結(jié)中的位置?；颊咚邢嚓P(guān)的臨床病理資料納入計(jì)算與下游非前哨淋巴結(jié)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移相關(guān)危險(xiǎn)因素的單因素分析(卡方檢驗(yàn))，單因素分析證實(shí)有意義的因

5、子進(jìn)一步納入多因素回歸分析以尋找獨(dú)立的相關(guān)因子。 79例符合研究標(biāo)準(zhǔn)的女性乳腺癌患者納入研究目的二。根據(jù)前哨淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移狀況，分為三組。A組(28例)，所有淋巴結(jié)包括前哨與非前哨淋巴結(jié)均無(wú)腫瘤細(xì)胞的證據(jù)；B組(25例)，僅微小腫瘤沉積出現(xiàn)于前哨淋巴結(jié)，來(lái)源于研究目的一病例，包括B1組(16例)，僅游離腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)于前哨淋巴結(jié)；B2組(9例)，僅微轉(zhuǎn)移出現(xiàn)于前哨淋巴結(jié)；C組(26例)，轉(zhuǎn)移出現(xiàn)于前哨淋巴結(jié)，非前哨淋巴結(jié)有或無(wú)轉(zhuǎn)移。

6、所有前哨淋巴結(jié)及非前哨淋巴結(jié)均按前哨淋巴結(jié)病理研究方案常規(guī)檢查。首先隨機(jī)從A，B1，B2組分別選擇兩對(duì)SLN與Non-SLN與DC-LAMP，CD68，CD123，F(xiàn)OXP3，行免疫組織化學(xué)反應(yīng)以確定DC-LAMP對(duì)成熟DC的特異性染色及效果。所有前哨淋巴結(jié)及非前哨淋巴結(jié)蠟塊切片均行與DC-LAMP抗體(BeckmanCoulter(R)France)免疫反應(yīng)的免疫組織學(xué)檢查以確認(rèn)成熟樹突狀細(xì)胞。蔡司圖象分析系統(tǒng)(AxioImager,

7、ZeissImagingSystems，Germany)定量分析每個(gè)淋巴結(jié)DC-LAMP陽(yáng)性細(xì)胞的相對(duì)密度(DC-LAMP陽(yáng)性細(xì)胞面積/淋巴結(jié)面積)。Wicoxon檢驗(yàn)和Mann-Whitney檢驗(yàn)分別用于DC-LAMP陽(yáng)性細(xì)胞相對(duì)密度的組內(nèi)和組間比較。與抗CD1a抗體(Immunotech(R)，F(xiàn)rance)的免疫化學(xué)反應(yīng)用于確定未成熟樹突狀細(xì)胞。 結(jié)果：研究目的一的49例患者中，20例前哨淋巴結(jié)為微轉(zhuǎn)移，29例前哨淋巴結(jié)為

8、游離腫瘤細(xì)胞；11例患者出現(xiàn)非前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(11/49，22.4％)，其中5例(17.2％)前哨淋巴結(jié)為游離腫瘤細(xì)胞，6例(30％)前哨淋巴結(jié)為微轉(zhuǎn)移(p=0.239)。多因素分析顯示微小轉(zhuǎn)移病灶的定位(淋巴結(jié)實(shí)質(zhì)vs淋巴竇或淋巴管道)(p=0.008)，pT分級(jí)(p=0.011)。微小轉(zhuǎn)移出現(xiàn)在淋巴實(shí)質(zhì)可確診91％(10/11)出現(xiàn)非前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者。年齡，分化程度，以及雌激素受體狀態(tài)儀在單因素分析顯示相關(guān)(p=0.036，0.

9、042，0.019)。而淋巴管侵潤(rùn)，血管侵潤(rùn)，及微小病灶大小與非前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)相關(guān)。 研究目的二DC-LAMP陽(yáng)性細(xì)胞相對(duì)密度的組內(nèi)比較顯示組A和組B前哨淋巴結(jié)DC-LAMP陽(yáng)性細(xì)胞平均密度較非前哨淋巴結(jié)高(P=0.024，0.009)；組C前哨淋巴結(jié)DC-LAMP陽(yáng)性細(xì)胞平均密度與非前哨淋巴結(jié)比較無(wú)明顯差異(P=0.107)。組間比較顯示各組前哨淋巴結(jié)DC-LAMP陽(yáng)性細(xì)胞平均密度無(wú)顯著差異；而組B(尤其組B2)非前哨淋巴結(jié)

10、DC-LAMP陽(yáng)性細(xì)胞平均密度較組A和組C顯著升高(P=0.023，0.007)。淋巴結(jié)中CD1a陽(yáng)性細(xì)胞與DC-LAMP陽(yáng)性細(xì)胞的出現(xiàn)相關(guān)。而CD68，CD123，F(xiàn)OXP3陽(yáng)性細(xì)胞在前哨與非前哨淋巴結(jié)并無(wú)顯著差別。 結(jié)論：本研究顯示乳腺癌前哨淋巴結(jié)中微小轉(zhuǎn)移病灶的定位(淋巴結(jié)實(shí)質(zhì)vs淋巴竇或淋巴管道)較微小轉(zhuǎn)移的大小與非前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有較好的相關(guān)。這將簡(jiǎn)化乳腺癌患者SLN出現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移時(shí)選擇腋窩淋巴結(jié)清掃的指征。 前哨