miR-21在胃癌中的細胞生物學(xué)作用.pdf

1、背景與目的：胃癌是目前世界上死亡率位列第二的惡性腫瘤，在我國仍居消化道惡性腫瘤發(fā)病率的首位。目前胃癌發(fā)生發(fā)展機制還不清楚，以往的研究主要基于癌基因和抑癌基因在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用，但癌基因和抑癌基因受到多種因素調(diào)控，表觀遺傳調(diào)控是重要調(diào)控機制之一。微小RNA(miRNA）是近年來新發(fā)現(xiàn)的一類小分子非編碼RNA，作為生物體內(nèi)源性的小RNA 分子，在生物體內(nèi)不僅僅是代謝產(chǎn)物，更是機體內(nèi)特異性的重要調(diào)控分子。它們參與了生物體的生長、發(fā)育、衰老

2、、死亡等各個生物過程的調(diào)控，最近的研究發(fā)現(xiàn)它們在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中也發(fā)揮著重要的作用。在人體多種腫瘤中都存在著miRNA的差異表達，它們通過調(diào)節(jié)下游靶基因的表達，或促進腫瘤發(fā)生發(fā)展，或抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展。在這些差異表達的miRNA中，miR-21 是較為特殊的一個，它在幾乎所有實體腫瘤中都高表達，而且這些高表達的miR-21 大都發(fā)揮類似原癌基因的作用，通過調(diào)節(jié)抑癌基因或與分化，凋亡相關(guān)的基因而促進腫瘤的發(fā)生發(fā)展。因此，本研究從miR-21

3、 與胃癌的關(guān)系入手，檢測其在胃癌中的表達情況并分析其與臨床病理特征之間的相關(guān)性，進一步研究miR-21 對胃癌細胞生物學(xué)行為（增殖，凋亡，侵襲）的影響。 方法：定量real-time PCR 檢測胃癌病人腫瘤組織及其正常組織中miR-21 表達情況；胃癌細胞株BGC-823轉(zhuǎn)染miR-21 前體（pre-miR-21）使其過表達miR-21，通過CCK8法檢測過表達miR-21 對胃癌細胞BGC-823 增殖能力的影響；通過流式

4、細胞儀檢測過表達miR-21 對胃癌細胞BGC-823 凋亡和細胞周期的影響；通過細胞劃痕實驗檢測過表達miR-21 對胃癌細胞BGC-823 遷移能力的影響。 結(jié)果：定量real-time PCR 檢測腫瘤組織及其周圍正常組織miRNA-21 表達結(jié)果顯示miR-21 在胃癌組織中高表達，腫瘤組織中miRNA-21 表達高于其正常組織者有20例，表達量相仿或低于其正常組織者10例，差異具統(tǒng)計學(xué)意義。腫瘤組織中miR-21 表達

5、量同胃癌分化程度相關(guān)，與年齡、性別、Borrmann 分型、部位及TNM 分期及遠處轉(zhuǎn)移無關(guān)。過表達miR-21后BGC-823細胞增殖能力提高，與Negative組和Control組對比差別具有統(tǒng)計學(xué)意義流式細胞儀檢測過表達miR-21后對BGC-823細胞凋亡及周期沒有影響。過表達miR-21后BGC-823細胞在創(chuàng)傷愈合模型中愈合速度較其他兩組快。 結(jié)論：miR-21 在胃癌中高表達，其表達量同胃癌分化程度相關(guān)。過表達mi