尼莫司汀聯(lián)合順鉑治療C6腦膠質(zhì)瘤的實驗研究.pdf

1、目的：腦膠質(zhì)瘤是最為常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性腫瘤，膠質(zhì)瘤的治療是長久以來困擾著神經(jīng)外科領(lǐng)域的難題。特別是高級別惡性膠質(zhì)瘤呈彌漫浸潤性生長，邊界不清，術(shù)后復(fù)發(fā)率高、預(yù)后差、死亡率高。膠質(zhì)瘤生物學(xué)特性決定了治療應(yīng)采取綜合治療，即以手術(shù)治療為主，術(shù)后配合放射治療、化學(xué)治療、免疫治療等。化療在腫瘤治療中的地位已經(jīng)明確并肯定。但是在臨床工作中我們發(fā)現(xiàn)，膠質(zhì)瘤的化學(xué)治療效果往往是難以令人滿意的，由于耐藥基因MGMT和血腦屏障的存在嚴(yán)重的影響了化療藥

2、物發(fā)揮作用。本次研究的目的是通過體外實驗和大鼠動物模型的體內(nèi)實驗來探討ACNU與CDDP聯(lián)合應(yīng)用治療膠質(zhì)瘤的效果，并與單純使用ACNU或CDDP的療效相比較，分析臨床聯(lián)合用藥的可行性和有效性。 材料與方法：體外培養(yǎng)鼠膠質(zhì)瘤C6細(xì)胞，隨機(jī)分為4組，對照組、CDDP組、ACNU組和ACNU+CDDP組。依據(jù)臨床藥物應(yīng)用劑量通過公式計算出實驗用藥劑量，四組分別給予化療藥物。運用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期、Annexin V-FITC/PI

3、檢測細(xì)胞凋亡。建立Wistar大鼠顱內(nèi)C6膠質(zhì)瘤模型，經(jīng)Gd-DTPA強(qiáng)化MRI掃描證實種瘤成功，隨機(jī)分為4組，分組方法同上。各組連續(xù)給藥3天后處死部分大鼠，HE染色對腫瘤組織進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，免疫組織化學(xué)法檢測增殖相關(guān)蛋白PCNA及凋亡相關(guān)蛋白bcl-2的表達(dá)情況；觀察剩余大鼠的生存情況。 結(jié)果：體外實驗可以觀察到ACNU+CDDP組較其余三組對藥物更為敏感，細(xì)胞大量死亡，剩余細(xì)胞形態(tài)明顯瘦弱。細(xì)胞凋亡檢測示ACNU+CDDP組

4、凋亡率增加，凋亡率為2.1％，與其它三組比較有顯著差異（p<0.01）。荷瘤大鼠動物實驗中，大鼠出現(xiàn)活動減少，精神萎靡，飲食減少，并逐漸出現(xiàn)功能障礙，平均生存期為29.41天，生存期比較分析顯示ACNU+CDDP組大鼠的生存期明顯長于其余三組。病理學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)ACNU+CDDP組出現(xiàn)明顯的細(xì)胞形態(tài)大小不一，核大深染，細(xì)胞呈極性排列，不規(guī)則，并存在大面積的凋亡、壞死。腫瘤邊緣離散灶的計數(shù)分析聯(lián)合用藥組要大大少于其余三組，有顯著統(tǒng)計學(xué)差別。免

5、疫組化檢測中PCNA陽性表達(dá)定位于胞核，聯(lián)合用藥組的表達(dá)率最低，為44.84％； Bcl-2蛋白陽性表達(dá)定位于胞漿，聯(lián)合用藥組的表達(dá)率也最低（p<0.01）。 結(jié)論：本研究中細(xì)胞實驗和動物實驗結(jié)果一致，ACNU+CDDP聯(lián)合用藥比單藥組更有效抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖，并促進(jìn)細(xì)胞凋亡發(fā)生，表明兩藥聯(lián)合治療膠質(zhì)痛的效果明顯優(yōu)于單獨使用ACNU或CDDP。在臨床研究中也同樣發(fā)現(xiàn)ACNU、CDDP聯(lián)合72小時輸注可以有效的抑制腫瘤的生長，但嚴(yán)