nm23-H1基因轉染對人肝癌7721細胞生物學行為的影響及其機制的初步研究.pdf

1、復旦大學碩士學位論文nm23H1基因轉染對人肝癌7721細胞生物學行為的影響及其機制的初步研究姓名：徐伯贏申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：申宗侯20030524第二部分nm23H1對全反式維甲酸誘導的SMMC7721細胞凋亡及其相應信號轉導途徑的影響為了探討nm23一H1與凋亡的關系，本文研究了nm23一H1轉染對全反式維甲酸(ATRA)誘導的7721細胞的凋亡的影響。用流式細胞儀和熒光染色顯示，在ATRA誘導下，

2、nm23～Hl／7721細胞的凋亡數(shù)明顯增加，表明nm23一Hl能促進轉染細胞的凋亡。迸一步的研究發(fā)現(xiàn)，在ATRA誘導下，nm23H1／7721細胞bcl2的表達沒有發(fā)生明顯改變，PKB的蛋白表達也沒有發(fā)生顯著變化，但其T308、$473位點磷酸化均較Mock細胞顯著降低，對抑癌基因p53的檢測表明，p53的mINA水平明顯下降。結果表明nm23一Hl轉染對ATRA誘導的7721細胞的凋亡的影響不是通過下調bcl2的表達實現(xiàn)的，有可能是

3、通過上調p53的表達，以及降低PKB的T308、$473位點磷酸化從而降低PKB的活性，以此增加7721細胞對ATRA誘導的凋亡的敏感性。另外，轉染nm23HleDNA后，P53mRNA表達明顯增強，提示rim23一Ht可能通過P53途徑誘導細胞凋亡。關鍵詞：nm23一H，，凋亡，全反式維甲酸，PKB，p53，bcl一2第三部分nm23一H1轉染后SMMC7721細胞黏附、遷移能力的變化及其信號轉導途徑的探討為了研究nm23一Hl轉染對

4、SMMC7721細胞轉移潛力的影響，本文測定了轉染nm23H1后細胞黏附、遷移能力的變化，發(fā)現(xiàn)nm23H1轉染細胞的黏附和遷移能力均顯著降低。為了進一步探討其黏附和遷移能力變化的機制，本文測定了轉染細胞整聯(lián)蛋白亞基值5和Bl的表達。nm23一HI／7721與Mock細胞相比，&5亞基的蛋白表達沒有發(fā)生明顯改變；而01亞基的蛋白總量也沒有發(fā)生明顯變化，但nm23一HI／7721細胞中未成熟的B1亞基(即未糖基化的)遠遠高于Mock細胞。利