肺動脈高壓大鼠骨髓間充質干細胞的生物學功能.pdf

1、目的：
　　通過研究肺動脈高壓(pulmonary arterial hypertension，PAH)大鼠骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells， BMSCs)的增殖、血管形成能力并其探討生物學特性。為BMSCs移植治療PAH提供初步的實驗依據(jù)。
　　方法：
　　在大鼠腹腔內給予10％野百合堿(60mg/kg)注射建立肺動脈高壓模型，按體重注射相應體積生理鹽水制作正常組

2、模型;MCT注射3周后同時測定PAH組和正常組大鼠肺血流動力學參數(shù)（平均肺動脈壓）、測左心室(LV)、室間隔(S)及右心室(RV)質量，利用RV/(LV+S)計算得到右心室肥厚指數(shù)RVHI; H.E染色觀察肺小動脈壁結構;通過血球自動分析儀測定大鼠靜脈血中的中性粒細胞百分比;密度梯度離心聯(lián)合貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)PAH組和正常組大鼠BMSCs，倒置顯微鏡下觀察并用照相機拍照BMSCs形態(tài);用流式細胞儀儀器檢測細胞多個表面抗原來綜合鑒定BMS

3、Cs，并在體外進行血管形成實驗;CCK-8法測定BMSCs的生長曲線。
　　結果：
　　1.野百合堿注射3周后，較正常組大鼠，PAH組大鼠mPAP和RVHI明顯升高(P＜0.01)。2.靜脈血分析:與正常組大鼠相比，PAH組大鼠中性粒細胞百分比顯著升高(P＜0.01)。3.H.E染色切片顯示PAH組大鼠肺小動脈管壁較正常組大鼠顯著增厚。4.流式細胞儀儀器檢測大鼠BMSCs表面標志:較正常組大鼠，PAH組大鼠BMSCs陽性表面

4、標志CD44、CD90表達率顯著減少(P＜0.05)，陰性表面標志CD31、CD34、CD45表達率顯著增加（P＜0.05）。5.PAH組大鼠BMSCs較正常組大鼠生長增殖能力均明顯下降。6.血管形成實驗:與正常組大鼠BMSCs比較，PAH組大鼠BMSCs形成血管腔數(shù)顯著減少（P＜0.01）。
　　結論：
　　1、通過采用在腹腔內注射野百合堿的方法成功制作大鼠肺動脈高壓模型。2、PAH大鼠體內存在炎癥。3、采用Ficoll密