脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞對野百合堿誘發(fā)的肺動(dòng)脈高壓大鼠肺小動(dòng)脈功能的影響.pdf

1、近來，本研究小組前期研究發(fā)現(xiàn)野百合堿(MCT)所致大鼠肺小動(dòng)脈的重構(gòu)先于肺動(dòng)脈壓力的增高，脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ADMSCs)移植可以改善肺小動(dòng)脈的重構(gòu)并降低肺動(dòng)脈壓力。但是，ADMSCs移植對MCT誘發(fā)大鼠肺動(dòng)脈高壓(PAH)的肺小動(dòng)脈功能的影響目前尚未明確。
　　目的：觀察ADMSCs早期和延遲干預(yù)對MCT誘發(fā)大鼠PAH進(jìn)程中肺小動(dòng)脈(SPA)的內(nèi)皮依賴性舒張(EDdR)、非內(nèi)皮依賴性舒張功能(EDiR)以及收縮功能(VCF)的影

2、響。
　　方法：采用SD大鼠腹股溝皮下脂肪，經(jīng)膠原酶消化法分離培養(yǎng)ADMSCs，移植前用帶綠色熒光蛋白(GFP)的腺病毒轉(zhuǎn)染標(biāo)記。7周齡雄性SD大鼠112只，隨機(jī)分為對照組(Ctr)、肺動(dòng)脈高壓組(PAH)、脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞早期干預(yù)組(ADMSCs-EI)和延遲干預(yù)組(ADMSCs-DI)。一次性腹腔注射MCT40mg/Kg建立肺動(dòng)脈高壓，Ctr組經(jīng)腹腔注射相同體積的生理鹽水。ADMSCs-EI組于MCT注射后1周，ADMSCs-

3、DI組于MCT注射后2周，經(jīng)左頸外靜脈一次性給予1ml ADMSCs(1×106)，Ctr組和PAH組經(jīng)左頸外靜脈一次性給予相同體積的生理鹽水。分別于ADMSCs移植后1W、2W、3W，右心導(dǎo)管法測定大鼠的肺動(dòng)脈平均壓(MPAP)，并采用離體血管張力法檢測大鼠肺小動(dòng)脈環(huán)對乙酰膽堿(Ach)、硝普鈉(SNP)、去甲腎上腺素(NE)的反應(yīng)。收縮或舒張敏感性用pD2值表示，pD2表示EC50(激動(dòng)劑產(chǎn)生其50％最大效應(yīng)的濃度)以10為底的負(fù)對

4、數(shù)值。
　　結(jié)果：(1)ADMSCs早期干預(yù)后1周，MPAP在Ctr、PAH、ADMSCs-EI組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[P均>0.05]。ADMSCs早期干預(yù)后2、3周與延遲干預(yù)后1、2、3周，與Ctr組相比，PAH組大鼠MPAP顯著升高[P均<0.05]；而與PAH組相比，ADMSCs-EI與ADMSCs-DI組MPAP顯著下降[P均<0.05]。ADMSCs-EI組1、2、3w分別與ADMSCs-DI組1、2、3w比較，ADMSCs

5、-EI組大鼠MPAP降低更明顯[P均<0.05]。
　　(2)ADMSCs早期干預(yù)后1、2、3周與延遲干預(yù)后1、2、3周，與Ctr組相比，PAH組大鼠肺小動(dòng)脈環(huán)對不同濃度Ach誘導(dǎo)的EDdR明顯減弱，其濃度-效應(yīng)曲線明顯右移，pD2值顯著降低[P均<0.05]；而與PAH組相比，ADMSCs-EI與ADMSCs-DI組大鼠肺小動(dòng)脈環(huán)的EDdR明顯改善[P均<0.05]。ADMSCs-EI組1、2、3w分別與ADMSCs-DI組1、

6、2、3w比較，大鼠肺小動(dòng)脈環(huán)EDdR在兩組間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[P均>0.05]。
　　(3)ADMSCs早期干預(yù)后1周，SNP誘導(dǎo)的EDiR在Ct r、PAH、ADMSCs-EI組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[P均>0.05]。ADMSCs早期干預(yù)后2、3周與延遲干預(yù)后1、2、3周，與Ctr組相比，PAH組大鼠肺小動(dòng)脈環(huán)的EDiR明顯減弱，其濃度-效應(yīng)曲線明顯右移，pD2值顯著降低[P均<0.05]；而與PAH組相比，ADMSCs-EI與ADMS

7、Cs-DI組大鼠肺小動(dòng)脈環(huán)的EDiR明顯改善[P均<0.05]。ADMSCs-EI組1、2、3w分別與ADMSCs-DI組1、2、3w比較，大鼠肺小動(dòng)脈環(huán)EDiR在兩組間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[P均>0.05]。
　　(4)ADMSCs早期干預(yù)后1、2、3周與延遲干預(yù)后1、2、3周，NE誘導(dǎo)的VCF在Ctr、PAH、ADMSCs-EI、ADMSCs-DI組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異[P均>0.05]。
　　結(jié)論：(1)MCT所致大鼠肺小動(dòng)脈的內(nèi)

8、皮依賴性舒張功能受損先于肺動(dòng)脈壓力的增高，MCT所致大鼠肺動(dòng)脈壓力升高與肺小動(dòng)脈舒張功能受損關(guān)系密切；
　　(2)無論ADMSCs早期干預(yù)還是延遲干預(yù)，ADMSCs移植后1、2、3周均可以改善受損的肺小動(dòng)脈內(nèi)皮依賴性及非內(nèi)皮依賴性舒張功能，有效地降低MCT誘導(dǎo)的肺動(dòng)脈高壓；
　　(3)ADMSCs早期干預(yù)組降低MCT誘導(dǎo)大鼠肺動(dòng)脈高壓的療效優(yōu)于延遲干預(yù)組，但是在改善受損的肺小動(dòng)脈內(nèi)皮及非內(nèi)皮依賴性舒張功能方面，ADMSCs早