PS341對小鼠急性重癥胰腺炎的實驗研究.pdf

1、急性胰腺炎(AP)是指胰腺消化酶被激活后對本器官自身及其周圍臟器產(chǎn)生消化作用而引起的全身性炎癥性疾病。根據(jù)病理變化可分為急性水腫性胰腺炎和急性出血性胰腺炎。其中急性出血性胰腺炎由于其發(fā)病急，進展快，是臨床常見的危重病，所以又叫急性重癥胰腺炎(SAP)?；颊咴缙诩纯沙霈F(xiàn)全身炎癥反應綜合癥(SIRS)及多器官功能不全(MODS)，死亡率高達20-30％。但是其發(fā)病機制尚未完全闡明。近年來，由于生活水平的改善，我國胰腺炎的發(fā)病率呈上升趨勢，同

2、時SAP所占比例也在增加。尋找有效的治療藥物，提高SAP的存活率，一直是臨床研究的熱點。 目前對于SAP的發(fā)病機制主要有以下幾種學說：經(jīng)典的膽道阻塞學說、“白細胞過度激活，多種細胞因子和炎癥遞質(zhì)級反應學說”、“胰腺缺血、微循環(huán)障礙學說”、“腸道細菌移位—胰腺組織繼發(fā)感染學說”等。1988年Rindemecht提出“白細胞過度激活，多種細胞因子和炎癥遞質(zhì)級反應學說”，該學說認為AP病情加重，引發(fā)多臟器損傷，部分與胰酶自身消化有關(guān)，

3、但單核巨噬細胞、中性粒細胞、內(nèi)皮細胞介入的多種細胞因子級聯(lián)反應在其中起主導作用。SAP時，單核巨噬細胞系統(tǒng)、中性粒細胞均被過度激活，產(chǎn)生大量的細胞因子、炎癥介質(zhì)；它們不僅于胰腺局部，還擴展至全身，并通過級聯(lián)反應，引發(fā)更多的細胞和細胞因子連鎖反應，造成SIRS和MODS。上述各種學說的提出，都能說明AP發(fā)病的某一方面。對于細胞因子介入AP發(fā)病的認知，希望能夠通過調(diào)整或抑制某些細胞因子的釋放來治療AP。但是對于某些細胞因子的特異性抑制，很難

4、阻斷眾多炎癥因子共同參與的“瀑布樣“級聯(lián)反應。研究顯示，作為多種細胞因子表達的上游調(diào)節(jié)因子，NF-κB是一個理想的用藥目標。平時NF-κB與IκB結(jié)合，以失活的形式存在，當細胞外炎癥信號引發(fā)細胞內(nèi)蛋白酶體(Proteasome)降解IκB，釋放出的NF-κB進入細胞核，啟動并產(chǎn)生多種細胞因子。PS341是一種蛋白酶體的特異性抑制劑。PS341通過抑制蛋白酶體，使NF-κB以失活的形式存在，以阻斷炎癥因子的產(chǎn)生，抑制SAP的發(fā)病過程。

5、 本實驗應用腹腔聯(lián)合注射蛙皮素(Cn)和脂多糖(LPS)，制作小鼠SAP模型，并用PS341進行治療，觀察各組小鼠血清淀粉酶、C反應蛋白(CRP)、乳酸脫氫酶(LDH)等指標及病理變化的差異，觀察PS341的治療作用。 實驗方法 1.動物來源：清潔級雌性ICR小鼠24只，體重20±1.5g,由浙江大學醫(yī)學院動物房提供。 2.實驗小鼠隨機分三組：生理鹽水制模組、二甲基亞砜(DMSO)對照組、PS341治療組。

6、 3.制模前12小時小鼠禁食不禁飲。 4.動物模型制作： 1)生理鹽水制模組：清潔級雌性ICR小鼠腹腔注射制模用生理鹽水(10ml/kg)7次，每次間隔1h，第六次注射雙倍生理鹽水。DMSO(10ml/kg)在首次注射生理鹽水后4.5h腹腔注射。 2)DMSO對照組：采用Cn和LPS聯(lián)合腹腔注射制作小鼠SAP模型。清潔級雌性ICR小鼠腹腔注射Cn(5mg/l，10ml/kg)7次，每次間隔1h，第六次同時注

7、射LPS(0.1％，10ml/kg)。DMSO(10ml/kg)在首次注射Cn后4.5h腹腔注射。 3)PS341治療組：采用Cn和LPS聯(lián)合腹腔注射制作小鼠SAP模型。清潔級雌性ICR小鼠腹腔注射Cn(5mg/l，10ml/kg)7次，每次間隔1h，第六次同時注射LPS(0.1％，10ml/kg)。PS341(0.05g/l，10ml/kg)在首次注射Cn后4.5h腹腔注射。 5.小鼠麻醉后，采用頸動脈取血，取胰腺標本