曲古霉素A和5-氮雜胞苷對(duì)胰島β細(xì)胞的保護(hù)作用.pdf

1、第一部分
　　 曲古霉素A和5-氮雜胞苷對(duì)細(xì)胞因子誘導(dǎo)損傷的胰島β細(xì)胞的保護(hù)作用
　　 目的：探討在細(xì)胞因子誘導(dǎo)條件下曲古霉素A(TSA)和5-氮雜胞苷（5-AzaC）對(duì)胰島β細(xì)胞增殖、凋亡及功能的影響。
　　 方法：體外培養(yǎng)大鼠胰島素瘤細(xì)胞(RIN-m5f)至指數(shù)增長(zhǎng)期，根據(jù)干預(yù)方案進(jìn)行分組:正常細(xì)胞組、IL-1β/IFN-γ組、TSA+IL-1β/IFN-γ組（不同TSA濃度）、5-AzaC+IL-1β/IF

2、N-γ組（不同5-AzaC濃度）、5-AzaC+TSA+IL-1β/IFN-γ組。采用噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測(cè)β細(xì)胞增殖活性、膜聯(lián)蛋白V-FITC/PI檢測(cè)β細(xì)胞凋亡率、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)葡萄糖刺激胰島素分泌能力。
　　 結(jié)果：TSA+IL-1β/IFN-γ組、5-AzaC+IL-1β/IFN-γ組、5-AzaC+TSA+IL-1β/IFN-γ組細(xì)胞增殖活性分別為79.2％、82.9％、89.1％，與IL-1β/

3、IFN-γ組(33.9％)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）;TSA+IL-1β/IFN-γ組、5-AzaC+IL-1β/IFN-γ組、5-AzaC+TSA+IL-1β/IFN-γ組凋亡率分別為8.2％、10.5％、7.9％，與IL-1β/IFN-γ組(16.6％)相比凋亡率降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（均P＜0.05）;TSA+IL-1β/IFN-γ組、5-AzaC+IL-1β/IFN-γ組、5-AzaC+TSA+IL-1β/IFN-γ組

4、細(xì)胞葡萄糖刺激胰島素分泌能力部分恢復(fù)[(5.53±0.16) ng/ml、(5.70±0.18) ng/ml、(5.90±0.10)ng/ml]，與IL-1β/IFN-γ組(3.21±0.17)ng/ml比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。
　　 結(jié)論：曲古霉素A和5-氮雜胞苷可以抑制細(xì)胞因子誘導(dǎo)的胰島β細(xì)胞凋亡和恢復(fù)β細(xì)胞的胰島素分泌功能。
　　 第二部分
　　 曲古霉素A和5-氮雜胞苷對(duì)高糖誘導(dǎo)損傷的胰島

5、β細(xì)胞的保護(hù)作用
　　 目的：探討高糖誘導(dǎo)條件下曲古霉素A(TSA)和5-氮雜胞苷（5-AzaC）和對(duì)胰島β細(xì)胞增殖、凋亡及功能的影響。
　　 方法：體外培養(yǎng)大鼠胰島素瘤細(xì)胞(RIN-m5f)至指數(shù)增長(zhǎng)期，根據(jù)干預(yù)方案進(jìn)行分組:正常細(xì)胞組、高糖(HG)組、TSA+HG組（不同TSA濃度）、5-AzaC+HG組（不同5-AzaC濃度）、5-AzaC+TSA+HG組。采用噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測(cè)β細(xì)胞增殖活性、膜聯(lián)蛋白V-

6、FITC/PI檢測(cè)β細(xì)胞凋亡率、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)葡萄糖刺激胰島素分泌能力。
　　 結(jié)果：TSA+HG組、5-AzaC+HG組、5-AzaC+TSA+HG組細(xì)胞增殖活性分別為79.2％、81.8％、87.5％，與HG組(63.2％)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）;TSA+HG組、5-AzaC+HG組、5-AzaC+ TSA+HG組細(xì)胞凋亡率分別為10.4％、9.9％、8.7％，與HG組(15.8％)相比凋亡