廣西豬源副粘病毒Guangxi株全基因的測(cè)序分析及生物學(xué)特性研究.pdf

1、豬的副粘病毒病是由副粘病毒科病毒引起的一類(lèi)豬的熱性傳染病，包括尼帕病毒病、“藍(lán)眼病”、梅那哥病毒病等。1999年以來(lái)我國(guó)許多省市報(bào)道在豬體內(nèi)也能分離到副粘病毒，經(jīng)過(guò)鑒定，證實(shí)流行于我國(guó)境內(nèi)的豬副粘病毒病是由豬源禽I型副粘病毒引起的。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)RT-PCR從廣西14個(gè)地市的732份發(fā)病豬組織中檢出1株陽(yáng)性樣品，經(jīng)雞胚接種、血凝抑制實(shí)驗(yàn)、BLAST序列比對(duì)等方法分離、鑒定出1株豬源禽I型副粘病毒，命名為Guangxi株。對(duì)Guangxi株進(jìn)

2、行最小致死量致死雞胚平均死亡時(shí)間(MDT)和1日齡維雞腦內(nèi)接種致病指數(shù)(ICPI)測(cè)定試驗(yàn)，其MDT值和ICPI指數(shù)分別為60小時(shí)和1.53; Guangxi株F蛋白112-117位裂解位點(diǎn)氨基酸序列與強(qiáng)毒株一致，均為R-R-Q-R-R-F; HN基因編碼的氨基酸長(zhǎng)度也與強(qiáng)毒株一致；小鼠在接種病毒104小時(shí)后開(kāi)始出現(xiàn)死亡，112小時(shí)內(nèi)8只小鼠全部死亡，而60日齡豬接種lmL病毒后無(wú)任何異常表現(xiàn)，但接毒20天后產(chǎn)生特異性抗體，效價(jià)為71o

3、g2～91og2。上述結(jié)果表明分離到的豬源禽I型副粘病毒Guangxi株為強(qiáng)毒株。參照GenBank中己發(fā)表的新城疫全基因序列，設(shè)計(jì)9對(duì)引物，以雞胚尿囊液提取的病毒總RNA為模板，擴(kuò)增出9段含有整個(gè)基因的相互重疊的序列，經(jīng)克隆、測(cè)序、拼接后，得到了Guangxi株的全基因序列。序列顯示，分離到的廣西豬源副粘病毒Guangxi株基因組由15，192個(gè)核苷酸組成，遵循“six of rule”原則，從基因的3’端至5’端依次排列著3'UTR