操作及低溫脅迫對(duì)四指馬鲅幼魚組織結(jié)構(gòu)和抗氧化系統(tǒng)的影響.pdf

1、為探究操作、運(yùn)輸脅迫對(duì)四指馬鲅（Eleutheronema tetradactylum）幼魚組織結(jié)構(gòu)及抗氧化系統(tǒng)的影響，本研究通過組織切片以及相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定技術(shù)，對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了分析對(duì)比，表明不同的脅迫方式對(duì)四指馬鲅幼魚造成不同程度的損傷，同時(shí)也反應(yīng)出四指馬鲅幼魚對(duì)應(yīng)激脅迫的應(yīng)答規(guī)律，其主要研究結(jié)果如下：
　　1急性操作脅迫對(duì)四指馬鲅幼魚肝臟、鰓、肌肉組織結(jié)構(gòu)和氧化應(yīng)激的影響
　　為探究急性操作脅迫對(duì)四指馬鲅幼魚組織結(jié)構(gòu)以及

2、氧化應(yīng)激的影響。該研究在離水操作脅迫后不同時(shí)間取樣，來觀察肝臟顯微結(jié)構(gòu)的變化，以及檢測(cè)相關(guān)抗氧化酶活性。結(jié)果顯示：隨著離水脅迫時(shí)間的延長，肝臟組織損傷程度出現(xiàn)一個(gè)先升后降的變化趨勢(shì)，脅迫24 h肝臟基本結(jié)構(gòu)與對(duì)照組相似；脅迫2 h后鰓小片、扁平上皮細(xì)胞以及線粒體豐富細(xì)胞都出現(xiàn)不同程度的損傷；肌肉從肌纖維變性、肌纖維束之間的間隙增寬，空泡化以至于肌肉組織整體失去固有形態(tài)，并且呈逐漸分解的趨勢(shì)。超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化氫酶（CAT）

3、在肝臟中，有相同的趨勢(shì)，最后其值顯著（P＜0.05）低于對(duì)照組；肌肉中SOD和還原型谷胱甘肽（GSH）有相同的變化趨勢(shì)，脅迫后的2 h顯著下降(P＜0.05)，但12 h則反升至最高值。肝臟中CAT和總抗氧化能力(T-AOC)處理后2 h其水平無顯著變化(P＞0.05)，之后升高直到12 h達(dá)到峰值。肝臟中丙二醛（MDA）含量在脅迫2~12 h出現(xiàn)先升高后下降的變化趨勢(shì)，12 h以后又有所上升；肌肉中MDA含量在脅迫后的2 h無顯著差異

4、(P＞0.05)，直到6 h達(dá)到峰值。肝臟中GSH含量在脅迫2h沒有顯著變化（P＞0.05），最終其含量仍顯著（P＜0.05）低于對(duì)照組；肌肉T-AOC在脅迫2h顯著上升（P＜0.05），之后下降，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)顯著低于（P＜0.05）對(duì)照組。肌肉中SOD和CAT在處理24 h后活性顯著低于處理前，其他酶活性變化不顯著。Na+-K+-ATP酶活性在處理后2 h顯著升高(P＜0.05)12 h達(dá)到峰值，24 h恢復(fù)到處理前水平。綜合以上結(jié)果得

5、出：離水操作脅迫確實(shí)對(duì)四指馬鲅幼魚肝臟組織結(jié)構(gòu)以及抗氧化酶產(chǎn)生一定的影響，但隨著脅迫時(shí)間的延長，肝臟組織結(jié)構(gòu)以及抗氧化能力都有一定的恢復(fù)趨勢(shì)，而鰓和肌肉則隨時(shí)間持續(xù)損傷呈現(xiàn)加重趨勢(shì)。
　　2運(yùn)輸脅迫對(duì)四指馬鲅幼魚組織結(jié)構(gòu)、抗氧化系統(tǒng)的影響以及抗應(yīng)激劑混合物的作用
　　為探究運(yùn)輸脅迫對(duì)四指馬鲅幼魚組織結(jié)構(gòu)、抗氧化系統(tǒng)的影響以及抗應(yīng)激劑的作用。該研究設(shè)置了對(duì)照組（未運(yùn)輸）和實(shí)驗(yàn)組，其中實(shí)驗(yàn)組包括：空白運(yùn)輸組和抗應(yīng)激劑組即運(yùn)輸過程

6、中添加抗應(yīng)激劑混合物（維生素C：谷氨酰胺=1:1）；實(shí)驗(yàn)組經(jīng)過運(yùn)輸6h后分別取樣。結(jié)果顯示：添加抗應(yīng)激劑組肝臟部分區(qū)域細(xì)胞排列疏松，肝板結(jié)構(gòu)不清晰；空白運(yùn)輸組肝臟組織整體失去固有形態(tài)，肝板結(jié)構(gòu)消失不見。添加抗應(yīng)激劑組的鰓絲排列混亂，線粒體豐富細(xì)胞體積變大；空白運(yùn)輸組鰓小片整體腫脹，部分鰓小片因紅細(xì)胞過多而漲破，線粒體豐富細(xì)胞體積變大且數(shù)量增多。添加抗應(yīng)激劑組的脾臟白髓區(qū)域相對(duì)增加，黑色素-巨噬細(xì)胞中心數(shù)量以及大小都有所增加；空白運(yùn)輸組脾

7、臟組織紅髓區(qū)域占據(jù)大部分，白髓區(qū)域相對(duì)較少,巨噬細(xì)胞中心減小。肝臟和肌肉中SOD活性值均顯著（P＜0.05）的表現(xiàn)為對(duì)照組>混合組>空白組，且肝臟中其活性值遠(yuǎn)高于肌肉中；肝臟中CAT活性值顯著（P＜0.05）的表現(xiàn)為空白組>對(duì)照組>混合組，而肌肉中則為混合組>對(duì)照組>空白組；肝臟MDA含量顯著（P＜0.05）的表現(xiàn)為空白組>混合組>對(duì)照組，肌肉中其值表明為對(duì)照組與混合組之間無顯著(P＞0.05)差異，而兩組均顯著（P＜0.05）低于空白

8、組，而肌肉中其含量值遠(yuǎn)高于肝臟中；肌肉中GSH含量顯著（P＜0.05）的表現(xiàn)為空白組>混合組>對(duì)照組，肝臟中其值表明為對(duì)照組與混合組之間無顯著(P＞0.05)差異，而兩組均顯著（P＜0.05）低于空白組；肝臟T-AOC值表現(xiàn)為顯著（P＜0.05）的空白組>混合組>對(duì)照組，而肌肉中則混合組與空白組之間無顯著(P＞0.05)差異，且顯著（P＜0.05）低于對(duì)照組；對(duì)照組鰓鈉鉀ATP酶活性值略高于混合組但不顯著(P＞0.05)，混合組顯著（P

9、＜0.05）高于空白組。該研究結(jié)果為四指馬鲅魚苗的運(yùn)輸，提高運(yùn)輸成活率提供參考資料。
　　3運(yùn)輸脅迫對(duì)四指馬鲅幼魚抗氧化系統(tǒng)的影響以及抗應(yīng)激劑的作用
　　為探究運(yùn)輸脅迫對(duì)四指馬鲅幼魚肝臟、肌肉抗氧化系統(tǒng)的影響以及抗應(yīng)激劑的生理作用。該研究設(shè)置了對(duì)照組、空白組、維生素 C組以及谷氨酰胺組，在運(yùn)輸試驗(yàn)進(jìn)行的2h、6h以及9h分別采集肝臟以及肌肉樣品進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定。測(cè)定項(xiàng)目包括：SOD,CAT,MDA,GSH,T-AOC。結(jié)果

10、顯示：運(yùn)輸脅迫使空白組肝臟和肌肉中SOD活性迅速升高，而抗應(yīng)激劑的存在使其最終活性低于對(duì)照組；運(yùn)輸脅迫使空白組肝臟和肌肉中 CAT活性顯著（P＜0.05）升高，雖然之后有所下將，但最后其活性值均顯著（P＜0.05）高于對(duì)照組，而維生素C組和谷氨酰胺組最終值與對(duì)照組無顯著差異（P＞0.05）或略高于對(duì)照組；運(yùn)輸脅迫使空白組肝臟和肌肉MDA含量均顯著（P＜0.05）升高，而抗應(yīng)激劑明顯緩解了這一結(jié)果；GSH含量在肝臟與肌肉中出現(xiàn)了不同的變化

11、趨勢(shì)，可能與二者所承擔(dān)的生理功能不同有關(guān)；運(yùn)輸脅迫后，空白組肝臟與肌肉T-AOC值均顯著（P＜0.05）高于對(duì)照組，而維生素 C組和谷氨酰胺組最終則略高于或等于對(duì)照組。本研究分析了運(yùn)輸脅迫下四指馬鲅幼魚抗氧化系統(tǒng)變化規(guī)律以及抗應(yīng)激的作用效果，為其人工養(yǎng)殖的推廣提供參考依據(jù)。
　　4急性低溫對(duì)四指馬鲅幼魚組織結(jié)構(gòu)、抗氧化系統(tǒng)以及鰓鈉鉀 ATP酶活性的影響
　　為探究急性低溫脅迫對(duì)四指馬鲅幼魚組織結(jié)構(gòu)、抗氧化系統(tǒng)以及鰓鈉鉀ATP

12、酶活性的影響。該研究設(shè)置了常溫（27±0.5℃）組、20℃組以及15℃組，三個(gè)溫度梯度進(jìn)行試驗(yàn)，以常溫組作為對(duì)照，并在試驗(yàn)進(jìn)行的2h、6h以及12h分別采集肝臟、肌肉、脾以及鰓樣品進(jìn)行觀察和測(cè)定。結(jié)果顯示：隨著處理時(shí)間的延長，20℃組的肝臟細(xì)胞空泡結(jié)構(gòu)呈增多，細(xì)胞核偏離，染色變淺趨勢(shì)；15℃組肝臟細(xì)胞排列混亂，肝板結(jié)構(gòu)不清晰，直到最后細(xì)胞核溶解，肝臟整體失去固有形態(tài)。隨著低溫處理時(shí)間的延長20℃組肌纖維出現(xiàn)輕微的彎曲現(xiàn)象到大部分肌纖維彎

13、曲，肌纖維之間與內(nèi)部均出現(xiàn)較大間隙；15℃組肌纖維間隙增大，部分?jǐn)嗔阎钡郊±w維之間與內(nèi)部均嚴(yán)重開裂，部分肌纖維溶解并暴露出細(xì)胞核。隨著低溫處理時(shí)間的延長20℃組主要表現(xiàn)為線粒體豐富細(xì)胞數(shù)目增多，鰓小片末端輕微的膨大到鰓小片整體水腫且嚴(yán)重彎曲，血管以及血竇內(nèi)出現(xiàn)大量的紅細(xì)胞，部分鰓小片因紅細(xì)胞過多而漲破；15℃組鰓小片表皮出現(xiàn)輕微的脫落，少部分鰓小片脹大到其吸水漲破，鰓小片基本形態(tài)不可見。SOD在肝臟和肌肉中，兩個(gè)溫度下均出現(xiàn)先升高后降低

14、的變化趨勢(shì)，而且最終都顯著（P＜0.05）低于對(duì)照組；兩個(gè)溫度下CAT在肝臟中出現(xiàn)均出現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，而在肌肉中兩個(gè)溫度下變化趨勢(shì)不同，但最終其活性值均顯著（P＜0.05）低于對(duì)照組；GSH在肝臟和肌肉中，兩個(gè)溫度下均出現(xiàn)下降趨勢(shì)，不同的是20℃的肌肉中出現(xiàn)一直顯著下降趨勢(shì)，而在肝臟以及15℃的肌肉中則是先下降后保持在一定值得趨勢(shì)；MDA在肝臟的兩個(gè)溫度下以及20℃條件下的肌肉中均出現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，而在15℃的肌肉中先升高保