正相色譜和反向色譜及c18柱子

1、正相色譜和反向色譜及正相色譜和反向色譜及C18柱子柱子反相與正相的區(qū)別在于，固定相與流動(dòng)相的極性大小。反相：固定相的極性小于流動(dòng)相的極性正相：固定相的極性大于流動(dòng)相的極性反向色譜流動(dòng)相極性大于固定相極性測定樣品時(shí)極性大的先出峰，正向反之在正相色譜中，一般采用極性鍵合固定相，硅膠表面鍵合的是極性的有機(jī)基團(tuán)，鍵合相的名稱由鍵合上去的基團(tuán)而定。最常用的有氰基（CN）、氨基（NH2）、二醇基（DIOL）鍵合相。流動(dòng)相一般用比鍵合相極性小的非極性

2、或弱極性有機(jī)溶劑，如烴類溶劑，或其中加入一定量的極性溶劑（如氯仿、醇、乙腈等），以調(diào)節(jié)流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度。通常用于分離極性化合物。一般認(rèn)為正相色譜的分離機(jī)制屬于分配色譜。組分的分配比K值，隨其極性的增加而增大，但隨流動(dòng)相中極性調(diào)節(jié)劑的極性增大（或濃度增大）而降低。同時(shí)，極性鍵合相的極性越大，組分的保留值越大。該法主要用于分離異構(gòu)體，極性不同的化合物，特別是用來分離不同類型的化合物。反相鍵合相色譜法在反相色譜中，一般采用非極性鍵合固定相，如

3、硅膠C18H37（簡稱ODS或C18）硅膠苯基等，用強(qiáng)極性的溶劑為流動(dòng)相，如甲醇水，乙腈水，水和無機(jī)鹽的緩沖液等。目前，對(duì)于反相色譜的保留機(jī)制還沒有一致的看法，大致有兩種觀商業(yè)名稱，本質(zhì)應(yīng)該都是一樣的。Merck公司的填料喜歡叫RP18。比如Merck的LiChrospherRP18，SuperspherRP18，PurospherRP18。因此，我認(rèn)為說“RP18“是改進(jìn)型的不妥當(dāng)。Merck的改進(jìn)表現(xiàn)在前邊的名字上比如LiCHros

4、pherSuperspherPurospher表現(xiàn)的是不同的性能C8是硅膠鍵合辛烷基，C18是硅膠鍵合十八烷基，C18的極性較C8的極性小，C18對(duì)分析物的保留性能強(qiáng)于C8，含碳量對(duì)分離效果和主要組分的保留時(shí)間起很大的影響，所以含碳量高，主要組分的保留時(shí)間越長。C8和C18都是反相色譜柱的一種，適用于分析弱極性的物質(zhì)，C8適合分析弱極性物質(zhì)里極性稍強(qiáng)的一類物質(zhì)，C18適合分析弱極性物質(zhì)里極性更弱的物質(zhì)。這是他們極性上的差別，但是差別并不

5、是特別明顯，一般能用C8分析的物質(zhì)，在C18上也能分離。C18比C8的碳鏈更長，因此帶來更好的保留特性。因此C8就更適合分析大分子類的物質(zhì)，比如一些球蛋白等，都用C8和緩沖鹽洗脫劑來配合使用。相反，分子量較小的物質(zhì)，經(jīng)常用C18來進(jìn)行分析和分離。鍵合相不同，導(dǎo)致同種組分在不同色譜柱上的保留時(shí)間不一致，對(duì)各組分的保留能力也會(huì)不同，峰位置就變化啦。C18前面看到“ODS”的字樣，ODS是英文octadecylsilane的所寫，意思是十八(