基于核酸探針和雙光子探針檢測生物活性小分子的研究.pdf

1、生命體就好比是一個復雜并且精確運行的工廠，而細胞作為完成生命活動的基礎單元每時每刻都發(fā)揮著自己相應的作用。而活躍在各個細胞內的如活性氧化物、硫醇類物質等活性小分子通過發(fā)生化學生物反應過程參與了新陳代謝、細胞內信號轉導等活動。在一定的濃度水平下，他們可以維持生物體正常生理活動;但其含量發(fā)生很大變化時，他們會導致新陳代謝的平衡打破，進而使生物體內生理功能紊亂，甚至引發(fā)重要的疾病。所以他們在體內濃度的高低經常作為一些疾病的診斷依據。因此檢測這

2、些活性小分子對了解生物體運轉的機理和一些疾病的早期診斷有著重要的意義?；谏锘钚孕》肿釉谏w的重要作用，我們結合核酸探針和雙光子探針在生命環(huán)境中檢測的優(yōu)勢，主要開展了兩個對生物小分子的研究工作:
　　(1)基于時間分辨光譜的核酸探針檢測生物硫醇:核酸探針的兩端分別標記了一個芘分子。并且核酸探針上的T堿基可以與汞離子(Hg2+)作用形成T-Hg2+-T結構，使核酸探針的構型發(fā)生變化從而加大了芘分子的距離并產生了單芘分子的熒光信號

3、。當生物硫醇存在時，它可與核酸探針上的T-Hg2+-T結構中的汞離子發(fā)生絡合反應，破壞了T-Hg2+-T結構，使核酸探針構型發(fā)生變化，構型的變化拉近兩個芘分子的距離產生雙芘信號。同時由于體系中還有γ-環(huán)糊精可以與雙芘分子發(fā)生主客體作用，使得雙芘分子的熒光強度增強并延長其熒光壽命，從而利用長熒光壽命的特點實現了在復雜樣品中對生物硫醇的檢測。
　　(2)基于雙光子探針和環(huán)糊精主客體作用檢測生物體內過氧化氫:將含有巰基的β-環(huán)糊精與金納