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文檔簡介
1、本論文選擇氟甲喹(FLU)作為目標物，制備能夠特異性識別氟甲喹的多克隆抗體，建立氟甲喹的膠體金標記免疫層析分析方法和膠體碳標記免疫層析分析方法;并應(yīng)用于動物源性食品中氟甲喹殘留的可視化檢測。在此基礎(chǔ)上建立膠體金和膠體碳標記的多殘留免疫層析分析方法。
采用碳二亞胺法和混合酸酐法分別制備免疫原FLU-BSA和FLU-KLH，免疫新西蘭大白兔獲得抗氟甲喹多克隆抗體。經(jīng)抗血清效價及抑制率的比較，最終選擇FLU-BSA為免疫原免疫的1號
2、兔產(chǎn)生的抗血清進行后續(xù)實驗，抗血清效價為1∶256000。優(yōu)化條件，建立間接競爭ELISA方法，靈敏度IC50值為10.9±2.62μg/L;檢出限IC15值為0.79±0.33μg/L。
建立氟甲喹膠體金標記免疫層析分析方法。膠體金顆粒的粒徑為20nm;金標抗體連接的最佳pH值為8.5、最適抗體量為20μg/mL;捕獲抗體的包被濃度為0.5mg/mL，二抗1∶200倍稀釋，選擇MillliporeHF135s硝酸纖維膜作為固
3、相載體，金標抗體1∶10稀釋噴涂到金標墊上;在最優(yōu)條件下組裝試紙條，將金標抗體鋪在結(jié)合釋放墊上的組裝方式其方法檢測限為20μg/L;選擇雞肉、牛肉、豬肉、魚肉、蝦肉、豬肝和牛奶7種實際樣品進行添加實驗，樣品檢測限為50μg/L。
建立氟甲喹膠體碳標記免疫層析分析方法。將碳標抗體鋪在結(jié)合釋放墊上不可行;將碳標抗體在溶液狀態(tài)下與標準品混合上樣方法，在最優(yōu)條件下組裝試紙條，檢測限為20μg/L。選擇雞肉、牛肉、豬肉、、魚肉、蝦肉、豬
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