桃仁承氣湯治療急性肺損傷-急性呼吸窘迫綜合征(ALI-ARDS)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過尾靜脈注射油酸的方法制作大鼠ALI/ARDS模型，觀察各組大鼠肺組織以及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、超氧化物歧化酶(SOD)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)和肺系數(shù)(LI)各項(xiàng)指標(biāo)的變化，從而以實(shí)驗(yàn)的方法探討桃仁承氣湯對ALI/ARDS的影響及其作用機(jī)制，以期為中醫(yī)臨床應(yīng)用和教學(xué)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征(ALI/AR

2、DS)指的是由心源性以外的各種肺內(nèi)外致病因素所引起的急性、進(jìn)行性和缺氧性呼吸衰竭。多數(shù)專家學(xué)者把嚴(yán)重的ALI或ALI的最終嚴(yán)重階段定義為ARDS。其在臨床上主要表現(xiàn)為咳嗽，喘憋，胸悶，呼吸頻率加快，甚至口唇發(fā)紺，多伴有腸鳴音減弱，腹脹便秘等。其基本的病理特點(diǎn)在于肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和肺泡上皮細(xì)胞廣泛受損，血管通透性增強(qiáng)引起肺間質(zhì)和肺泡水腫，肺內(nèi)開放的血管減少形成微血栓，導(dǎo)致肺內(nèi)微循環(huán)障礙。[1]中醫(yī)文獻(xiàn)中雖無ALI和ARDS病名的記載，但

3、根據(jù)其臨床所表現(xiàn)的呼吸窘迫、口唇發(fā)紺、腹部脹滿、大便秘結(jié)等特點(diǎn)，可將之歸屬于“暴喘”、“結(jié)胸”和“腑實(shí)”等范疇。針對ALI/ARDS的臨床表現(xiàn)，中醫(yī)從“肺與大腸相表里”這一體現(xiàn)臟腑相關(guān)整體觀的理論出發(fā)，將其病機(jī)特點(diǎn)概括為肺腸同病。[2]本研究根據(jù)ALI/ARDS的中醫(yī)病機(jī)特點(diǎn)，且依據(jù)“肺與大腸相表里”的理論及中醫(yī)藥的現(xiàn)代藥理研究，選用桃仁承氣湯對ALI/ARDS大鼠進(jìn)行治療。桃仁承氣湯，最早見于吳又可的《溫疫論》中，他在《傷寒論》桃核承

4、氣湯的基礎(chǔ)上去掉桂枝、甘草，加當(dāng)歸、芍藥、丹皮組方而成。[3]吳鞠通在《溫病條辨》中收載此方，并在用量上稍作變動?！稖夭l辨·下焦篇》第21條:“少腹堅(jiān)滿，小便自利，夜熱早涼，大便閉，脈沉實(shí)者，蓄血也。桃仁承氣湯主之?！北痉焦ι脼a熱通腑，活血化瘀。[4]因此，本病可以采用桃仁承氣湯瀉下和逐瘀并舉，通腑氣以利肺氣，利肺氣以助血行，恢復(fù)肺主治節(jié)的功能。通過觀察大鼠腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、超氧化物歧化酶

5、(SOD)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)和肺系數(shù)(LI)各項(xiàng)指標(biāo)的變化，明確桃仁承氣湯治療ALI/ARDS的作用機(jī)制，為臨床治療ALI/ARDS和中醫(yī)教學(xué)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　1.選用健康清潔級雌性Wistar大鼠32只，體重250±10g，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周，測體溫后，逐一稱重并按重量標(biāo)號，按照隨機(jī)分配的原則分為4組，每組8只:空白組(Normal control gro

6、up，N)、模型組(Model group，M)、桃仁承氣湯組(Taorenchengqi Decoction group，T)、地塞米松組(Dexamethasone group，D)。其中除空白組外，其余各組均采用尾靜脈注射油酸(0.12 ml·kg-1)的方法制作ALI/ARDS大鼠模型。
　　2.實(shí)驗(yàn)給藥:根據(jù)人用藥量與實(shí)驗(yàn)動物用藥劑量的換算公式，計(jì)算出大鼠的用藥量。四組均喂普通飼料，T組以5.13g·kg-1·d-1桃仁

7、承氣湯灌胃，D組以2mg·kg-1·d-1地塞米松腹腔注射，N組和M組分別給予等量蒸餾水灌胃，給藥容積為10ml·kg-1·d-1。四組均分別于造模1h和4h后各治療一次。
　　3.指標(biāo)檢測:從飼養(yǎng)開始至實(shí)驗(yàn)結(jié)束每天早晚測量大鼠體溫2次，正常飲水進(jìn)食，并密切觀察大鼠的二便情況;實(shí)驗(yàn)結(jié)束時股動脈取血，用于檢測大鼠血中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、超氧化物歧化酶(SOD)、血栓素B2(TXB2)、6-

8、酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)各項(xiàng)指標(biāo)的變化;取全肺精確稱重，用于計(jì)算肺系數(shù)(LI);取右肺部分肺臟組織迅速置于4％多聚甲醛液中固定，脫水，石蠟包埋，行HE染色，用于光鏡下觀察肺臟結(jié)構(gòu)和變化。
　　結(jié)果:
　　1.一般情況觀察空白組大鼠活動靈活，呼吸平穩(wěn)，毛發(fā)光澤，進(jìn)食飲水及二便等無明顯改變;模型組大鼠活動遲鈍，蜷臥易驚，毛發(fā)光澤缺失，呼吸困難，頻率明顯增快，嚴(yán)重者出現(xiàn)四肢紫紺，進(jìn)食飲水情況差，大便干結(jié)，排便

9、量明顯減少;桃仁承氣湯組和地塞米松組大鼠活動、飲食、二便等整體狀況較模型組均有不同程度的改善。
　　2.各組大鼠血中指標(biāo)檢測結(jié)果TNF-α測定結(jié)果，與空白組比較，模型組大鼠TNF-α水平明顯升高(P＜0.01)。與模型組相比，桃仁承氣湯組和地塞米松組大鼠TNF-α水平下降有顯著性差異(P＜0.01)。桃仁承氣湯組和地塞米松組之間無明顯差異（P＞0.05）。
　　IL-1β測定結(jié)果，與空白組比較，模型組大鼠IL-1β水平明顯升

10、高(P＜0.01)。與模型組相比，桃仁承氣湯組和地塞米松組大鼠IL-1β水平下降有差異（P＜0.05）。桃仁承氣湯組和地塞米松組之間無明顯差異（P＞0.05）。
　　SOD測定結(jié)果，與空白組比較，模型組大鼠SOD水平明顯下降(P＜0.01)。與模型組相比，桃仁承氣湯組和地塞米松組大鼠SOD水平升高有差異（P＜0.05）。桃仁承氣湯組和地塞米松組之間無明顯差異（P＞0.05）。
　　TXB2測定結(jié)果，與空白組比較，模型組大鼠T

11、XB2水平明顯升高(P＜0.01)。與模型組相比，桃仁承氣湯組和地塞米松組大鼠TXB2水平下降有差異（P＜0.05）。桃仁承氣湯組和地塞米松組之間無明顯差異（P＞0.05）。
　　6-keto-PGF1α測定結(jié)果，與空白組比較，模型組大鼠6-keto-PGF1α水平降低（P＜0.05）。但模型組、桃仁承氣湯組和地塞米松組三組之間無明顯差異（P＞0.05）。
　　3.肺系數(shù)(LI)計(jì)算結(jié)果與空白組對比，模型組大鼠LI明顯升高(

12、P＜0.01)，但模型組、桃仁承氣湯組和地塞米松組三組之間無明顯差異（P＞0.05）。
　　4.光鏡下肺組織病理形態(tài)學(xué)觀察空白組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)完整，未見病理改變;模型組大鼠肺泡間隔明顯增寬，毛細(xì)血管擴(kuò)張充血，間質(zhì)大量炎癥細(xì)胞浸潤，肺泡結(jié)構(gòu)廣泛破壞，肺泡壁增厚，肺泡腔內(nèi)水腫、出血，部分有透明膜形成;桃仁承氣湯組和地塞米松組肺組織病理變化較模型組明顯改善，肺泡間隔變窄，少量滲出和炎性細(xì)胞浸潤，毛細(xì)血管輕度擴(kuò)張充血，肺泡腔內(nèi)水腫減輕，未

13、見明顯透明膜形成。
　　結(jié)論:
　　1.桃仁承氣湯能升高ALI/ARDS大鼠超氧化物歧化酶(SOD)水平，降低腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)、血栓素B2(TXB2)水平，并且減輕肺間質(zhì)及肺泡炎性細(xì)胞的浸潤、滲出和積聚，改善肺水腫與肺瘀血，有一定的肺保護(hù)作用，短期治療效果與地塞米松無顯著性差異（P＞0.05）。證明桃仁承氣湯對ALI/ARDS具有一定的治療作用。
　　2.桃仁承氣湯對ALI