人囊胚線粒體DNA含量與體外受精-胚胎移植結(jié)局的關(guān)系探究.pdf

1、背景：
　　胚胎移植結(jié)局取決于于多個(gè)方面，如內(nèi)分泌和實(shí)驗(yàn)室的條件、患者的年齡、子宮和卵巢條件等，此外，移植的胚胎的質(zhì)量也是重要原因之一。研究表明，線粒體供能不足與高齡移植失敗及不明原因的胚胎停育密切相關(guān)[1，2]，因此，關(guān)于線粒體DNA(mtDNA)含量能否作為預(yù)測(cè)胚胎移植結(jié)局的標(biāo)志物的問(wèn)題愈加引起學(xué)者們的關(guān)注。目前，已有研究提示在早期胚胎中，mtDNA拷貝數(shù)多則往往預(yù)示著移植結(jié)局失敗，而mtDNA拷貝數(shù)少則預(yù)示著移植成功[3，4

2、]。同時(shí)，有研究指出兩者并無(wú)確切相關(guān)性[5]。因此，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)人類整倍體胚胎囊胚期mtDNA的拷貝數(shù)的相對(duì)含量進(jìn)行分析，以期對(duì)囊胚期線粒體DNA含量與體外受精-胚胎移植結(jié)局的關(guān)系做出進(jìn)一步探索。
　　目的：
　　探究人囊胚線粒體DNA含量與體外受精-胚胎移植結(jié)局的關(guān)系。
　　方法：
　　1.構(gòu)建全基因組擴(kuò)增產(chǎn)物(whole genome amplification，WGA)樣本的基因文庫(kù);
　　2.運(yùn)用以

3、二代測(cè)序(next generation sequencing，NGS)為基礎(chǔ)的拷貝數(shù)變異測(cè)序(copy number variation sequencing，CNV-Seq)對(duì)已構(gòu)建的文庫(kù)進(jìn)行測(cè)序;
　　3.利用RUPA極速信息分析系統(tǒng)對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行mtDNA拷貝數(shù)相對(duì)于常染色體DNA拷貝數(shù)的含量測(cè)定。
　　結(jié)果：
　　1.收集來(lái)自中國(guó)的77對(duì)夫妻的89個(gè)整倍體囊胚期胚胎的WGA產(chǎn)物，其中65對(duì)夫妻行單囊胚移植，1

4、2對(duì)夫妻行雙囊胚移植。來(lái)自美國(guó)的112個(gè)行單囊胚移植的胚胎和39對(duì)行雙囊胚移植的胚胎PGD/PGS測(cè)序結(jié)果。
　　2.單囊胚移植移植成功組與失敗組的囊胚期mtDNA相對(duì)拷貝數(shù)無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05）。對(duì)女方年齡及胚胎等級(jí)分別進(jìn)行分層后比較移植結(jié)局與囊胚期mtDNA相對(duì)拷貝數(shù)，依然無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　3.在雙囊胚移植中，未發(fā)現(xiàn)囊胚期mtDNA相對(duì)拷貝數(shù)高低與移植成功失敗的明顯對(duì)應(yīng)關(guān)系。
　　結(jié)