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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討阿霉素對(duì)大鼠膈肌的損傷機(jī)制及促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin,EPO)對(duì)阿霉素(doxorubicin, DOX)致大鼠膈肌損傷的作用。
方法:雄性SD大鼠50只,隨機(jī)分為對(duì)照組、DOX組、EPO+DOX組、EPO組。給藥方法:對(duì)照組10只:腹腔注射N(xiāo)S;DOX組15只:大鼠腹腔先注射N(xiāo)S,之后0.5 h注射DOX,每次2.5 mg/kg,每周3次,連續(xù)2周,共6次,總量15 mg/kg;EPO+DOX組
2、15只:大鼠腹腔先注射EPO,每次2500 U/kg,每周3次,連續(xù)2周,共6次,每次EPO注射之后0.5 h注射DOX,每周3次,連續(xù)2周,共6次;EPO組10只:大鼠腹腔注射EPO,每次2500 U/kg,每周3次,連續(xù)2周,共6次,總量15000 U/kg。經(jīng)過(guò)2周,麻醉后行氣管插管,記錄呼吸功能參數(shù):呼吸頻率(RF)、潮氣量(TV)、肺通氣量(PV)、最大肺通氣量(MVV);動(dòng)脈血?dú)夥治觯簷z測(cè)二氧化碳分壓(PaCO2)、氧分壓(
3、PaO2)、氧飽和度(SaO2)及pH值;應(yīng)用離體大鼠膈肌肌條方法,分別測(cè)量其單收縮張力(Pt)、最大強(qiáng)直張力(Po)、峰值收縮時(shí)間(CT)、半舒張時(shí)間(1/2RT)、張力最大上升速率(+dT/dtmax)、張力最大下降速率(-dT/dtmax)、張力-頻率曲線(xiàn)(Force-frequency curve)及疲勞指數(shù)(FI)的變化,同時(shí)測(cè)定膈肌組織超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)的含量。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR
4、)檢測(cè)膈肌組織中肌漿網(wǎng)鈣泵(SERCA)、磷酸受鈉蛋白(PLB)、Bax、Bcl-2基因表達(dá)的變化;并用光鏡和電鏡觀察膈肌組織的形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)的變化。
結(jié)果:(1)與對(duì)照組比較,DOX組大鼠呼吸頻率、潮氣量、肺通氣量、最大肺通氣量均明顯低于正常對(duì)照組(P﹤0.01),EPO+DOX組比DOX組明顯提高(P﹤0.01)。DOX組大鼠膈肌Pt、Po、+dT/dtmax、-dT/dtmax明顯低于對(duì)照組(P﹤0.01), EPO+D
5、OX組Pt、Po、+dT/dtmax、-dT/dtmax高于DOX組(P﹤0.01),EPO組大鼠膈肌的Pt、Po、+dT/dtmax、-dT/dtmax與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。DOX組的CT、1/2RT明顯長(zhǎng)于對(duì)照組及EPO組(P﹤0.01)。予10、20、40、60、100 Hz頻率的方波電壓刺激膈肌時(shí),DOX組大鼠膈肌張力明顯低于正常對(duì)照組和EPO組(P﹤0.01)。(2)與對(duì)照組比較,DOX組大鼠膈肌組織的SOD活力明顯降
6、低, MDA含量明顯升高(P﹤0.01),EPO+DOX組的SOD活力明顯提高(P﹤0.01), MDA含量明顯降低(P﹤0.01)。EPO組與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(3)光鏡下,DOX組大鼠膈肌肌纖維紊亂、萎縮甚至斷裂;電鏡顯示阿霉素導(dǎo)致膈肌細(xì)胞肌纖維腫脹,線(xiàn)粒體空泡化。(4)RT-PCR研究顯示:與DOX組比較,EPO+DOX組的SERCA mRNA表達(dá)顯著提高(P﹤0.01),PLB mRNA表達(dá)顯著降低(P﹤0.01)。與
7、對(duì)照組相比較,DOX組的Bax mRNA表達(dá)水平明顯增高(P﹤0.01),Bcl-2 mRNA表達(dá)水平明顯降低(P﹤0.01),Bcl-2/Bax比值顯著降低(P﹤0.01);而與DOX組相比較,EPO+DOX組的Bcl-2 mRNA表達(dá)增高,Bax mRNA表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異, Bcl-2/Bax比值顯著增高(P﹤0.01)。
結(jié)論:阿霉素導(dǎo)致大鼠膈肌收縮和舒張功能減低,脂質(zhì)過(guò)氧化、細(xì)胞內(nèi)鈣超載和膈肌細(xì)胞凋亡增加,其機(jī)理可能與
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