促紅細(xì)胞生成素對阿霉素致大鼠膈肌損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的：探討阿霉素對大鼠膈肌的損傷機(jī)制及促紅細(xì)胞生成素（erythropoietin，EPO）對阿霉素（doxorubicin, DOX)致大鼠膈肌損傷的作用。
　　方法：雄性SD大鼠50只，隨機(jī)分為對照組、DOX組、EPO+DOX組、EPO組。給藥方法：對照組10只：腹腔注射NS；DOX組15只：大鼠腹腔先注射NS，之后0.5 h注射DOX，每次2.5 mg/kg，每周3次，連續(xù)2周，共6次，總量15 mg/kg；EPO+DOX組

2、15只:大鼠腹腔先注射EPO，每次2500 U/kg，每周3次，連續(xù)2周，共6次，每次EPO注射之后0.5 h注射DOX，每周3次，連續(xù)2周，共6次；EPO組10只：大鼠腹腔注射EPO，每次2500 U/kg，每周3次，連續(xù)2周，共6次，總量15000 U/kg。經(jīng)過2周，麻醉后行氣管插管，記錄呼吸功能參數(shù)：呼吸頻率（RF）、潮氣量（TV）、肺通氣量（PV）、最大肺通氣量（MVV）；動脈血?dú)夥治觯簷z測二氧化碳分壓（PaCO2）、氧分壓（

3、PaO2）、氧飽和度(SaO2)及pH值；應(yīng)用離體大鼠膈肌肌條方法，分別測量其單收縮張力（Pt）、最大強(qiáng)直張力（Po）、峰值收縮時間(CT)、半舒張時間(1/2RT)、張力最大上升速率(+dT/dtmax）、張力最大下降速率(-dT/dtmax)、張力-頻率曲線(Force-frequency curve)及疲勞指數(shù)(FI)的變化，同時測定膈肌組織超氧化物歧化酶（SOD)活力和丙二醛(MDA)的含量。應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR

4、）檢測膈肌組織中肌漿網(wǎng)鈣泵（SERCA）、磷酸受鈉蛋白(PLB)、Bax、Bcl-2基因表達(dá)的變化；并用光鏡和電鏡觀察膈肌組織的形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)的變化。
　　結(jié)果：（1）與對照組比較，DOX組大鼠呼吸頻率、潮氣量、肺通氣量、最大肺通氣量均明顯低于正常對照組（P﹤0.01），EPO+DOX組比DOX組明顯提高（P﹤0.01）。DOX組大鼠膈肌Pt、Po、+dT/dtmax、-dT/dtmax明顯低于對照組（P﹤0.01）， EPO+D

5、OX組Pt、Po、+dT/dtmax、-dT/dtmax高于DOX組（P﹤0.01），EPO組大鼠膈肌的Pt、Po、+dT/dtmax、-dT/dtmax與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。DOX組的CT、1/2RT明顯長于對照組及EPO組（P﹤0.01）。予10、20、40、60、100 Hz頻率的方波電壓刺激膈肌時，DOX組大鼠膈肌張力明顯低于正常對照組和EPO組（P﹤0.01）。（2）與對照組比較，DOX組大鼠膈肌組織的SOD活力明顯降

6、低， MDA含量明顯升高（P﹤0.01），EPO+DOX組的SOD活力明顯提高（P﹤0.01）， MDA含量明顯降低（P﹤0.01）。EPO組與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。(3)光鏡下，DOX組大鼠膈肌肌纖維紊亂、萎縮甚至斷裂；電鏡顯示阿霉素導(dǎo)致膈肌細(xì)胞肌纖維腫脹，線粒體空泡化。(4)RT-PCR研究顯示：與DOX組比較，EPO+DOX組的SERCA mRNA表達(dá)顯著提高(P﹤0.01)，PLB mRNA表達(dá)顯著降低(P﹤0.01)。與

7、對照組相比較，DOX組的Bax mRNA表達(dá)水平明顯增高(P﹤0.01)，Bcl-2 mRNA表達(dá)水平明顯降低(P﹤0.01)，Bcl-2/Bax比值顯著降低(P﹤0.01)；而與DOX組相比較，EPO+DOX組的Bcl-2 mRNA表達(dá)增高，Bax mRNA表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異， Bcl-2/Bax比值顯著增高(P﹤0.01)。
　　結(jié)論：阿霉素導(dǎo)致大鼠膈肌收縮和舒張功能減低，脂質(zhì)過氧化、細(xì)胞內(nèi)鈣超載和膈肌細(xì)胞凋亡增加，其機(jī)理可能與