異丙酚群體藥動(dòng)學(xué)及微透析采樣影響因素研究.pdf

1、目的:1．建立反相高效液相梯度洗脫法測定人血漿中異丙酚濃度，為群體藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究奠定方法學(xué)基礎(chǔ)。2．進(jìn)行新疆地區(qū)腫瘤患者的異丙酚群體藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究并建立群體藥物代謝動(dòng)力學(xué)模型，估算出相應(yīng)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)，分析身高、體重、年齡、種族等因素對相應(yīng)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響。3．探討用微透析技術(shù)對脂溶性藥物異丙酚進(jìn)行采樣的可行性，考察灌注速度、灌注液成分以及微透析媒介對異丙酚微透析探針回收率的影響，為微透析技術(shù)應(yīng)用于脂溶性分析物提

2、供科學(xué)依據(jù)。
　　方法:1．高效液相實(shí)驗(yàn):以卡馬西平為內(nèi)標(biāo)，色譜柱為HanbonScience＆．Technology C18(4.6 mm×250 mm，5μm)，流動(dòng)相以乙腈/甲醇混合液(乙腈-甲醇按80∶20(v/v)的比例配制，作為有機(jī)相）-水（水相加1％的三氟乙酸調(diào)ph值到4）進(jìn)行二元梯度洗脫，0～7 min(50∶50，v/v)，7～9 min(50∶50～70∶30，v/v)，9～22 min(70∶30，v/v);

3、流流速為1.0 ml/min，檢測波長為274 nm，進(jìn)樣量為20μL，柱溫為40℃。2．群體藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究:采集新疆醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院95例（漢族54例，維吾爾族32例，哈薩克族9例）用異丙酚進(jìn)行麻醉手術(shù)的腫瘤患者的血樣，用高效液相色譜法檢測血藥濃度。采用Excel、SPSS20.0進(jìn)行血藥濃度數(shù)據(jù)整理、統(tǒng)計(jì)，采用Monolix4.3.3群體藥物代謝動(dòng)力學(xué)軟件進(jìn)行分析。在選取的基礎(chǔ)的三房室藥代動(dòng)力學(xué)模型的基礎(chǔ)上，將年齡、性別、體

4、重、民族等固定效應(yīng)對應(yīng)于中央室清除率(CL)、中央室表觀分布容積（V1）、淺周邊室清除率(Q2)、淺周邊室表觀分布容積（V2）、深周邊室清除率(Q3)和深周邊室表觀分布容積（V3）這六個(gè)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)分別進(jìn)行作圖分析，如果存在一定的相關(guān)性，則逐一引入模型。采用向前納入法和向后剔除法建立全量回歸模型。采用隨機(jī)近似期望最大化(SAEM)算法，建立最終模型。采用直觀預(yù)測檢驗(yàn)法(VPC)對最終模型進(jìn)行內(nèi)部驗(yàn)證。3．微透析實(shí)驗(yàn):體外采用增量法和減量法

5、實(shí)驗(yàn)評估探針的回收率，使用高效液相色譜法檢測分析物濃度，探討脂溶性分析物異丙酚進(jìn)行微透析采樣的可行性。考察相同實(shí)驗(yàn)條件下，不同的灌注速度對異丙酚乳劑探針回收率的影響;不同的微透析媒介對探針回收率的影響;灌注液中含不同濃度羥丙基-β-環(huán)糊精的灌注液對異丙酚乳劑和異丙酚對照品溶液探針回收率的影響。
　　結(jié)果:1．高效液相實(shí)驗(yàn):異丙酚的血藥濃度在0.10～25μg/mL內(nèi)線性良好(r=0.9998)，定量限為0.10μg/mL;高(12

6、.50μg/mL)、中(1.56μg/mL)、低(0.19μg/mL)3個(gè)濃度的平均方法回收率均在85％～115％之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）均＜10％;日內(nèi)、日間RSD均＜10％。2．群體藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究:估算的六個(gè)群體藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)如下:中央室清除率(CL)=7.78-0.069*AGEi，單位:L/min;中央室表觀分布容積（V1）=13.4 L;淺周邊室清除率(Q2)=1.47+0.749*log(B Wi/63)，單位:

7、L/min;淺周邊室表觀分布容積(V2)=54.9 L;深周邊室清除率(Q3)=0.1 L/min;深周邊室表觀分布容積（V3）=171 L。體重因素與淺周邊室清除率(Q2)具有很明顯正相關(guān)性，與中央室表觀分布容積（V1）、淺周邊室表觀分布容積(V2)具有一定的相關(guān)性;年齡因素與中央室清除率(CL)具有很明顯的負(fù)相關(guān)性，與淺周邊室清除率(Q2)和中央室表觀分布容積（V1）具有一定的相關(guān)性。3．微透析實(shí)驗(yàn):①灌注速度的影響:各個(gè)流速下異丙

8、酚乳劑增量法實(shí)驗(yàn)和減量法實(shí)驗(yàn)的回收率值均存在顯著性差異(P＜0.01)。流速為1.0μl/min時(shí)，增量法和減量法實(shí)驗(yàn)回收率的均值高于其它流速，增量法和減量法實(shí)驗(yàn)的回收率值分別為0.33％和45.68％，且二者的相關(guān)性也最強(qiáng)(R2=0.96)。②灌注液中不含羥丙基-β-環(huán)糊精時(shí)，異丙酚乳劑與異丙酚對照品溶液的回收率比較:乳劑減量法的回收率值高于增量法;對照品減量法的回收率值高于增量法;乳劑增量法的回收率值高于對照品;對照品減量法的回收率

9、值高于乳劑。③灌注液中加入羥丙基-β-環(huán)糊精時(shí)，乳劑與對照品增量法和減量法回收率的比較:對于乳劑，六種加入量下均為減量法的回收率高于增量法;對于對照品，加入量為1％(w/v)時(shí)，減量法的回收率值均高于增量法，加入量為10％(w/v)時(shí)，增量法的回收率值總體上高于減量法，加入量為20％(w/v)時(shí)，減量法的回收率值總體上高于增量法。④相同的羥丙基-β-環(huán)糊精加入量(1％、10％、20％，w/v)下，乳劑與對照品的回收率比較:對于增量法實(shí)驗(yàn)

10、，對照品的回收率值總體上高于乳劑;對于減量法實(shí)驗(yàn)，加入量為1％時(shí)，對照品的回收率值總體上高于乳劑，加入量為10％時(shí)，乳劑的回收率值總體上高于對照品;加入量為20％時(shí)，0.5～3.5h乳劑的回收率值高于對照品，在4.0～11.0h，二者的回收率值接近。⑤灌注液中加入羥丙基-β-環(huán)糊精對乳劑及對照品回收率的影響:增量法的回收率:對于乳劑，在羥丙基-β-環(huán)糊精加入量為0.5％～10％(w/v)的范圍內(nèi)，回收率值隨加入量的增加而增大，但在10％

11、～20％(w/v)的加入量范圍內(nèi)，回收率值反而加入量的增加而減小;對照品增量法的回收率值也有相似的趨勢。減量法的回收率:對于乳劑，羥丙基-β-環(huán)糊精加入量為0.5％～10％(w/v)時(shí)，對回收率值影響不大，但加入量為15％、20％(w/v)時(shí)，回收率略有降低。對于對照品，加入量為1％(w/v)時(shí)對回收率值影響不大，加入10％、20％(w/v)時(shí)，回收率值顯著降低。
　　結(jié)論:1．高效液相實(shí)驗(yàn):本研究所建立的高效液相色譜法靈敏、準(zhǔn)確

12、、簡單，可用于異丙酚的血藥濃度檢測和群體藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究。2．群體藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究:通過考察人口統(tǒng)計(jì)學(xué)特征因素對新疆腫瘤患者異丙酚群體藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的影響，運(yùn)用Monolix藥動(dòng)學(xué)軟件建立了符合新疆地區(qū)腫瘤患者人群特征的異丙酚的群體藥物代謝動(dòng)力學(xué)模型，所估算的群體藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)可以較好地反應(yīng)新疆地區(qū)腫瘤患者異丙酚的群體特征。3．微透析實(shí)驗(yàn):脂溶性物質(zhì)異丙酚的微透析探針回收率比一般水溶性物質(zhì)要低。增量法的回收率值和減量法的回收率值存在差異