逆三相膜萃取生物堿分離純化工藝研究.pdf

1、目的：建立逆三相膜萃取生物堿（尼古丁及氧化槐果堿），利用高效液相色譜法（HPLC）和紫外-可見分光光度法（UV）對提取物尼古丁和氧化槐果堿進(jìn)行定性定量分析。
　　方法：1.聚四氟乙烯膜（PTFE）作為萃取膜，有機(jī)溶劑為氯仿，水相和有機(jī)相體積比2.5∶1，0.01mol/L硫酸作為酸相萃取劑，1.25mol/L氫氧化鈉作為堿相萃取劑，流速6mL/min，萃取時間25min。2.在單因素試驗的基礎(chǔ)上，采用L16（45）正交試驗進(jìn)一步考

2、察條件，水相和有機(jī)相體積比為1∶1，0.3mol/L鹽酸作為酸相萃取劑，0.75mol/L氫氧化鈉作為堿相萃取劑，流速6mL/min、萃取時間60min。由直觀分析可知，選取鹽酸濃度（A）、氫氧化鈉濃度（B）、提取時間（C）、體積比（D）4個因素，設(shè)計每個因素選取4個水平時，最佳提取工藝為A2B3C4D1，以鹽酸濃度影響最大。
　　結(jié)果：1.最佳實驗條件下，尼古丁在25min內(nèi)萃取率達(dá)到99.07％；高效液相色譜法定性定量分析尼古

3、丁時色譜柱為C18柱（259mm×4.6mm），流動相為甲醇-0.2%磷酸水溶液（10∶90），進(jìn)樣量為10μL，柱溫25℃，檢測波長261nm，回歸方程：Y=34014X+225.23，（r=0.9995，n=6），0.01～0.35μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，精密度RSD為0.98%，穩(wěn)定性RSD為1.16%，重復(fù)性RSD為0.67%，平均加樣回收率為99.26%。伊犁、巴楚、山東、庫車和和田等五種產(chǎn)地1g煙草葉中尼古丁含量分別為

4、24.43mg、23.12mg、21.39mg、13.72mg和5.93mg，伊犁煙草葉中尼古丁含量最高；2.最佳條件下氧化槐果堿在60min內(nèi)萃取率達(dá)到98.21%。高效液相色譜法測定條件：Shim-packVP-ODS色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），流動相為甲醇-0.2%磷酸水溶液（7∶93），梯度洗脫，流速1mL/min，進(jìn)樣量5μL，柱溫30℃，檢測波長221nm，在0.01～0.7mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方