逆三相膜萃取生物堿分離純化工藝研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:建立逆三相膜萃取生物堿(尼古丁及氧化槐果堿),利用高效液相色譜法(HPLC)和紫外-可見分光光度法(UV)對提取物尼古丁和氧化槐果堿進行定性定量分析。
  方法:1.聚四氟乙烯膜(PTFE)作為萃取膜,有機溶劑為氯仿,水相和有機相體積比2.5∶1,0.01mol/L硫酸作為酸相萃取劑,1.25mol/L氫氧化鈉作為堿相萃取劑,流速6mL/min,萃取時間25min。2.在單因素試驗的基礎(chǔ)上,采用L16(45)正交試驗進一步考

2、察條件,水相和有機相體積比為1∶1,0.3mol/L鹽酸作為酸相萃取劑,0.75mol/L氫氧化鈉作為堿相萃取劑,流速6mL/min、萃取時間60min。由直觀分析可知,選取鹽酸濃度(A)、氫氧化鈉濃度(B)、提取時間(C)、體積比(D)4個因素,設(shè)計每個因素選取4個水平時,最佳提取工藝為A2B3C4D1,以鹽酸濃度影響最大。
  結(jié)果:1.最佳實驗條件下,尼古丁在25min內(nèi)萃取率達到99.07%;高效液相色譜法定性定量分析尼古

3、丁時色譜柱為C18柱(259mm×4.6mm),流動相為甲醇-0.2%磷酸水溶液(10∶90),進樣量為10μL,柱溫25℃,檢測波長261nm,回歸方程:Y=34014X+225.23,(r=0.9995,n=6),0.01~0.35μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,精密度RSD為0.98%,穩(wěn)定性RSD為1.16%,重復(fù)性RSD為0.67%,平均加樣回收率為99.26%。伊犁、巴楚、山東、庫車和和田等五種產(chǎn)地1g煙草葉中尼古丁含量分別為

4、24.43mg、23.12mg、21.39mg、13.72mg和5.93mg,伊犁煙草葉中尼古丁含量最高;2.最佳條件下氧化槐果堿在60min內(nèi)萃取率達到98.21%。高效液相色譜法測定條件:Shim-packVP-ODS色譜柱(250mm×4.6mm,5μm),流動相為甲醇-0.2%磷酸水溶液(7∶93),梯度洗脫,流速1mL/min,進樣量5μL,柱溫30℃,檢測波長221nm,在0.01~0.7mg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,回歸方

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