二萜生物堿的分離純化及中藥指紋圖譜研究.pdf

1、二萜生物堿是烏頭屬、翠雀屬、飛燕草屬及繡線菊屬植物中的活性成分，具有鎮(zhèn)痛、抗炎和抗心律失常等生理活性作用。從植物中提取分離二萜生物堿一直是科研工作者關(guān)注的課題。本文采用反相高效液相制備色譜分離純化二萜生物堿，并分別采用HPLC-MS技術(shù)和1HNMR技術(shù)，建立了草烏等藥材的質(zhì)量控制方法。具體內(nèi)容如下:
　　在反相高效液相色譜法中，生物堿的色譜峰拖尾是一種長期存在的現(xiàn)象，它將降低生物堿的分離分析效果。本文研究了色譜柱和流動相對二萜生物

2、堿分離的影響，經(jīng)篩選確定色譜柱為HCEC18，流動相為0.2％甲酸水溶液-乙腈，二萜生物堿的拖尾現(xiàn)象得以有效消除，首次在酸性流動相且不加鹽的條件下，以反相高效液相制備色譜分離純化二萜生物堿。以草烏中二萜生物堿為目標(biāo)化合物，對新方法進(jìn)行分離驗(yàn)證，取得較好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果:從草烏粗產(chǎn)品中分離出4個二萜生物堿，其純度均高于98.0％。通過NMR和MS對其進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定，確定2個已知二萜生物堿:烏頭堿和14-苯甲酰烏頭原堿，同時(shí)發(fā)現(xiàn)2個新二萜生物堿:

3、1，15-dimethoxy-3-hydroxy-14-benzoyl-16-ketoneoline和8-ethoxyl-14-Benzoyl-15-methyoxyaconine。
　　當(dāng)草烏中二萜生物堿和其它組分同時(shí)檢測，非二萜生物堿很難一起被檢測出，致使樣品信息不完整。本文采用HPLC-MS技術(shù)，建立了草烏的指紋圖譜。本方法能有效增加指紋圖譜的信息量，更準(zhǔn)確反映樣品的特征。同時(shí)用中藥指紋圖譜相似度評價(jià)軟件對不同來源的草烏及其

4、炮制品進(jìn)行可量化的分析，得到其相似度值，進(jìn)而對樣品進(jìn)行有效的鑒定，繪制特征指紋曲線，通過聚類分析來直觀顯示樣品的近似程度和差異。結(jié)果顯示本指紋圖譜具有一定的專屬性，能夠反映草烏及其炮制品質(zhì)量的差異。
　　建立了一種基于大孔吸附樹脂法的中藥1HNMR指紋圖譜方法。采用大孔吸附樹脂富集草烏等藥材中的有效成分，以1HNMR為檢測手段，結(jié)合主成分分析和系統(tǒng)聚類分析，進(jìn)一步評價(jià)樣品的質(zhì)量。本指紋圖譜方法具有較高的重復(fù)性和特征性，能夠準(zhǔn)確反映