肝損傷后炎癥因子表達(dá)與細(xì)胞周期變化的研究.pdf

1、目的:
　　研究肝損傷后炎癥因子IL-6、MCP-1、TGF-β、TNF-α表達(dá)水平的變化，及肝損傷后肝細(xì)胞周期變化，旨在探討肝損傷后炎癥因子與細(xì)胞周期之間的關(guān)系，為肝臟疾病臨床治療提供思路。
　　方法:
　　1、HepG2細(xì)胞株培養(yǎng)于DMEM培養(yǎng)基。細(xì)胞生長至對數(shù)期時(shí)，用不同濃度乙醇對細(xì)胞進(jìn)行處理，共分為三組（空白對照組、0.001M、0.01M），應(yīng)用qRT-PCR技術(shù)檢測不同濃度乙醇作用后細(xì)胞中mRNA的表達(dá)量。

2、
　　2、Hep3B細(xì)胞株培養(yǎng)于MEM培養(yǎng)基，HepG2和L02細(xì)胞株培養(yǎng)于DMEM培養(yǎng)基，三系細(xì)胞在不同濃度乙醇或四氯化碳處理24小時(shí)后，采用流式細(xì)胞周期儀檢測各組細(xì)胞周期變化。用不同濃度四氯化碳作用L02細(xì)胞3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)后檢測各組細(xì)胞周期變化，用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理，每個(gè)樣品至少重復(fù)三次實(shí)驗(yàn)。
　　結(jié)果:
　　1 Real-Time PCR結(jié)果
　　與空白對照組相比，

3、乙醇濃度為0.001M、0.01M時(shí)IL-6mRNA的表達(dá)水平增高；且乙醇濃度為0.01M時(shí)，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（以 actin作為內(nèi)參， P<0.05）。
　　與空白對照組相比，乙醇濃度為0.001M、0.01M時(shí)MCP-1mRNA的表達(dá)水平增高；且乙醇濃度為0.01M時(shí)，P<0.01，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　與空白對照組相比，0.001M組和0.01M組TGF-βmRNA表達(dá)水平有所增高，且乙醇濃度為0.001

4、M時(shí)，P<0.001，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　與空白對照組相比，0.001M組和0.01M組TNF-αmRNA的表達(dá)水平有所增高，乙醇濃度為0.001M時(shí)，P<0.05，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2細(xì)胞周期檢測結(jié)果
　　不同濃度乙醇和四氯化碳作用Hep3B、HepG2和L02細(xì)胞后，可見各組細(xì)胞G2期細(xì)胞比例有所增多。不同濃度CCl4處理L02細(xì)胞3、6、12、24小時(shí)后，見隨著CCl4作用時(shí)間延長，G2期細(xì)胞百