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1、NK細(xì)胞通過(guò)其表面的各種活化性受體和抑制性受體發(fā)揮作用,目前已知的NK細(xì)胞活化性受體有多種,主要包括NKG2D、NCRs家族(NKp30、NKp44、NKp40)等,抑制性受體主要包括KIRs、LAG-3、TIGIT等。近些年發(fā)現(xiàn)癌胚抗原相關(guān)黏附分子1 (CEACAM1)具有免疫抑制性分子的功能,成為研究熱點(diǎn)。CEACAM1是癌胚抗原CEACAM家族重要的成員,其廣泛表達(dá)于腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和上皮細(xì)胞。其作用方式為互為
2、受配體,能和TIM-3形成異源二聚體,也能和NKG2D作用,抑制下游信號(hào)。以往的研究多關(guān)注在CEACAM1對(duì)腫瘤細(xì)胞代謝及生長(zhǎng)的調(diào)控上,近幾年研究熱點(diǎn)轉(zhuǎn)移到其對(duì)免疫細(xì)胞功能的調(diào)控上,在結(jié)腸癌模型中,聯(lián)合阻斷T細(xì)胞上CEACAM1和TIM-3的表達(dá),獲得了比PD-1抗體更好的療效,小鼠生存期明顯延長(zhǎng),腫瘤大小得到控制。由于NK細(xì)胞上表達(dá)CEACAM1, CEACAM1是否同樣能調(diào)控NK細(xì)胞的功能?為此我們進(jìn)行了研究。
我們使用R
3、T-PCR和qPCR比較了多種細(xì)胞系上CEACAM1的mRNA的表達(dá)分布,使用FACS分別檢測(cè)腫瘤細(xì)胞系和NK細(xì)胞系上CEACAM1的表達(dá)量。為了探討細(xì)胞因子對(duì)NK細(xì)胞CEACAM1的表達(dá)調(diào)控作用,我們選用細(xì)胞因子IL-12、IL-4處理NK細(xì)胞。為了研究CEACAM1相互作用對(duì)NK細(xì)胞功能的影響,我們采用慢病毒包裝系統(tǒng),在293T細(xì)胞上過(guò)表達(dá)CEACAM1,再與不同程度表達(dá)CEACAM1的NK細(xì)胞系進(jìn)行共培養(yǎng),檢測(cè)脫顆粒水平及細(xì)胞因子
4、分泌水平的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:NK-92細(xì)胞高表達(dá)CEACAM1,NKG細(xì)胞低表達(dá)CEACAM1,腫瘤細(xì)胞均不表達(dá)或低表達(dá)CEACAM1。IL-12能夠顯著上調(diào)NKG細(xì)胞上CEACAM1的表達(dá), IL-4對(duì)NK-92細(xì)胞作用不明顯。穩(wěn)轉(zhuǎn)CEACAM1的靶細(xì)胞能夠降低共培養(yǎng)過(guò)程中NK-92細(xì)胞、NKG細(xì)胞的脫顆粒水平,抑制NKG細(xì)胞Granzyme B的分泌,降低NK-92細(xì)胞的IFN-γ分泌水平。CEACAM1顯著地抑制了NK細(xì)胞的直接
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