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文檔簡介
1、自噬是細胞內(nèi)主要用于降解大分子蛋白質(zhì)或受損傷的細胞器如細胞核和線粒體等,以此來維持細胞動態(tài)平衡的代謝途徑。盡管自噬相關(guān)基因(ATG)相繼在酵母,植物及哺乳動物細胞中被發(fā)現(xiàn),但其在單細胞真核原生動物四膜蟲(Tetrahymena)中的同源基因尚未被鑒定。本研究首次克隆發(fā)現(xiàn)了四膜蟲的自噬相關(guān)基因TtATG8,該基因所編碼的蛋白質(zhì)序列與酵母ATG8和人LC3基因的蛋白質(zhì)序列具有很高的同源性。我們的研究發(fā)現(xiàn)雷帕霉素(Rapamycin)處理可導(dǎo)
2、致TtATG8表達的增加;同時在熒光顯微鏡下可觀察到EGFP-TtATG8綠色熒光信號增強,結(jié)果提示TtATG8可作為衡量四膜蟲自噬水平的良好指標(biāo)。我們的研究還發(fā)現(xiàn)饑餓處理可誘導(dǎo)增強自噬的發(fā)生,TtATG8表達水平并隨后增加細胞死亡率;雷帕霉素預(yù)處理可放大饑餓條件下的細胞中TtATG8的轉(zhuǎn)錄水平,同時通過增強自噬作用和防止ATP的消耗來增加細胞存活率。另外,我們的研究結(jié)果提示TtATG8過表達可促進細胞內(nèi)ATP的積累并延長細胞生存期。綜
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