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1、目的:通過(guò)監(jiān)測(cè)血清GnRH、LH、T及垂體組織LHβmRNA、LHβprotein在低血糖應(yīng)激后的動(dòng)態(tài)變化,探討低血糖應(yīng)激(acute hypoglycemia stress)對(duì)大鼠下丘腦-垂體-性腺軸(HPG)的影響。
方法:42只8周齡雄性Sprague Dawley大鼠,體重280-320g,隨機(jī)分為0分鐘組(只進(jìn)行置管而不給予低血糖應(yīng)激,即為對(duì)照組)、15分鐘組、30分鐘組、60分鐘組、90分鐘組。實(shí)驗(yàn)大鼠均于麻醉狀態(tài)
2、下行頸動(dòng)靜脈插管術(shù),鉗夾試驗(yàn)于插管術(shù)后16-24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行,對(duì)照組不行鉗夾試驗(yàn)直接進(jìn)行標(biāo)本采集,實(shí)驗(yàn)組通過(guò)鉗夾試驗(yàn)建立低血糖動(dòng)物模型(血糖2.2~2.8mmol/L),分別于低血糖持續(xù)15分鐘、30分鐘、60分鐘、90分鐘后行心臟采血,采血后立即斷頭,迅速分離并取出垂體。采用ELISA法測(cè)定各組大鼠血清GnRH、LH、T水平,實(shí)時(shí)熒光定量PCR法分析各組大鼠垂體組織LHβmRNA表達(dá)水平,Western Blot法分析各組大鼠垂體組織L
3、Hβprotein的表達(dá)。應(yīng)用SPSS22.0軟件處理和分析數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以(X)±SD表示,使用單因素方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:1、低血糖應(yīng)激各組間血清GnRH水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2、低血糖應(yīng)激15分鐘后血清LH升高并達(dá)到高峰,較0分鐘組有顯著差異(p<0.05);60分鐘組血清LH較15分鐘組、30分鐘組均顯著降低(p<0.05),較0分鐘組輕度升高(無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異);90分鐘組血清LH進(jìn)一步下降,較0
4、分鐘組明顯降低(p<0.05)。3、低血糖應(yīng)激15分鐘后血清T升高并達(dá)到高峰,較0分鐘組有顯著差異(p<0.05);30分鐘組血清T較15分鐘組輕度降低(無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異),較0分鐘組顯著升高(p<0.05);90分鐘組血清T進(jìn)一步下降,較15分鐘組、30分鐘組顯著降低(p<0.05),但基本恢復(fù)基線水平。4、低血糖應(yīng)激15分鐘后垂體LHβmRNA表達(dá)水平升高并達(dá)到高峰,較0分鐘組有顯著差異(p<0.05);60分鐘組LHβmRNA表達(dá)水平
5、較15分鐘組、30分鐘組均顯著降低(p<0.05),較0分鐘組輕度降低(無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異);90分鐘組LHβmRNA表達(dá)水平較15分鐘顯著降低(p<0.05),但基本恢復(fù)基線水平(無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異)。5.垂體LHβprotein變化與垂體LHβmRNA變化基本一致。
結(jié)論:1、低血糖應(yīng)激能影響大鼠HPG軸。2、低血糖應(yīng)激對(duì)血中GnRH水平無(wú)明顯影響。3、低血糖應(yīng)激可引起大鼠血清LH水平先上升后下降。4、低血糖應(yīng)激可引起大鼠血清T水平先
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