藥物溶解度和聯(lián)合用藥對(duì)經(jīng)鞏膜給藥的影響.pdf

1、目的：
　　眼后節(jié)疾病占眼部疾病的絕大多數(shù)，是致盲的主要原因之一。對(duì)于眼后段疾病的治療，經(jīng)鞏膜給藥比玻璃體腔給藥更為安全、靶向傳遞性更好。本研究的目的是探索藥物溶解度和聯(lián)合用藥對(duì)經(jīng)鞏膜給藥的影響，提高藥物經(jīng)鞏膜表面?zhèn)鬟f到視網(wǎng)膜/玻璃體的滲透率。
　　方法：
　　曲安奈德（Triamcinolone Acetonide）、雙氯芬酸（Diclofenac）和環(huán)孢霉素（Cyclosporine A）三種藥物在PBS液中的溶出

2、速率采用搖瓶的實(shí)驗(yàn)方法研究，即將藥物放入37℃搖床中持續(xù)震蕩，并自放入搖床起在達(dá)到飽和狀態(tài)之前開始進(jìn)行連續(xù)多個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣，然后檢測(cè)藥物濃度。藥物的溶解度是將一種藥物或兩種過量藥物溶于PBS液后放在37℃搖床中24h，使其達(dá)到溶解平衡狀態(tài)，然后檢測(cè)上清液中的藥物濃度。用高效液相色譜儀（HPLC）檢測(cè)TA和DIC的濃度，島津超快速液相色譜儀（UFLC）檢測(cè)CsA的濃度。由于CsA溶解度低、分子量大，難以經(jīng)鞏膜滲透到視網(wǎng)膜/玻璃體，故在溶液中

3、加入不同含量的α-環(huán)糊精（αCD）以增加 CsA的溶解度。采用離體擴(kuò)散池的裝置研究鞏膜/脈絡(luò)膜的滲透效率，即將兔眼特定位置的眼球壁完整取下來置于5mm垂直擴(kuò)散池的上下室之間，上室加藥物混懸液，下室收集液體。首先用環(huán)鉆從新鮮的去掉眼前節(jié)和玻璃體液的兔眼眼后段組織鉆取直徑為9mm的眼壁（鞏膜-脈絡(luò)膜或者鞏膜-脈絡(luò)膜/視網(wǎng)膜），以視神經(jīng)為分界線將眼后段分成視神經(jīng)上下兩部分。供體池中加入一種或兩種聯(lián)合藥物的混懸液，于室溫條件下在預(yù)設(shè)時(shí)間點(diǎn)（2h

4、、4h、6h、8h、10h）從受體池中取樣，采用高效液相色譜儀（ HPLC）、超高壓液相色譜-質(zhì)譜連用（UHPLC-MS/MS）儀器檢測(cè)樣本中的藥物濃度，繼而計(jì)算滲透系數(shù)。運(yùn)用多因素方差分析的方法，分析藥物滲透系數(shù)（Y）與藥物投放模式（DIC、TA、CsA、（TA+CsA）、（TA+DIC）等）、藥物在鞏膜的部位、藥物溶解度的關(guān)系并分析比較聯(lián)合用藥在經(jīng)鞏膜給藥時(shí)是如何相互作用的。
　　結(jié)果：
　　體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果：TA、DIC、

5、CsA三種藥物在PBS液中的溶出速度比較DIC>TA＞CsA。三種單一藥物 TA、CsA、DIC在 PBS液中的溶解度分別為（11.2±0.52）μg/mL、（10.08±2.17）μg/mL、（618.37±5.98）μg/mL。（TA+DIC）聯(lián)合混懸液中TA的溶解度為（10.82±0.33）μg/mL，DIC的溶解度為（599.74±13.56）μg/mL；（TA+CsA）聯(lián)合混懸液中TA的溶解度為（16.43±0.13）μg/m

6、L，CsA的溶解度為（10.14±0.079）μg/mL；（DIC+CsA）聯(lián)合混懸液中DIC和CsA的溶解度分別為（479±8.645）μg/mL、（11.93±0.22）μg/mL。單一藥物TA在PBS液中的溶解度較（TA+CsA）聯(lián)合混懸液中TA的溶解度小，P＜0.05；單一藥物DIC在PBS液中的溶解度較（TA+DIC）和（CsA+DIC）聯(lián)合混懸液中DIC的溶解度大，P＜0.05；單一藥物CsA在PBS液中的溶出量（10.08

7、±2.17）μg/mL和聯(lián)合混懸液(CsA+TA)中 CsA的濃度（10.14±0.079）μg/mL相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P﹥0.05），與(DIC+CsA)聯(lián)合混懸液中CsA的濃度(11.93±0.22）μg/mL比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。增溶劑α-環(huán)糊精（αCD）可以明顯地增加難溶性藥物 CsA的溶解度，是原藥溶解度的77倍。10％αCD/CsA在TA和DIC聯(lián)合應(yīng)用時(shí)αCD不僅增加了CsA溶解度而且也增加了TA和DIC的

8、溶解度，此時(shí)TA的溶解度是（46.94±06.35）μg/mL，DIC的溶解度是（715.65±1.35）μg/mL。
　　擴(kuò)散池實(shí)驗(yàn)結(jié)果：鞏膜-脈絡(luò)膜壁（ S/C）組的滲透系數(shù)（（3.32±0.29） x10-6cm/sec）和鞏膜-脈絡(luò)膜/視網(wǎng)膜（ S/C/R）組的滲透系數(shù)（（2.84±0.45） x10-6cm/sec）相比，無顯著性差異（P=0.3668﹥0.05）；視神經(jīng)下位置的滲透系數(shù)（4.02±0.368）x10-6

9、cm/sec比視神經(jīng)上位置的滲透系數(shù)（3.28±0.357）x10-6cm/sec大，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別趨勢(shì)（P=0.0667﹤0.1）。單一藥物經(jīng)鞏膜-脈絡(luò)膜壁的滲透系數(shù)（Permeability coefficient即Pc）比較：TA﹥DIC﹥CsA，Pc：TA vs DIC vs CsA（6.69±0.398）x10-6cm/sec vs（2.75±0.34）x10-6cm/sec vs（3.58±3.52）x10-8cm/sec，

10、P＜0.05，說明TA經(jīng)鞏膜-脈絡(luò)膜壁滲透性最好，CsA滲透性最差。TA與DIC聯(lián)合混懸液中 DIC經(jīng)鞏膜-脈絡(luò)膜壁給藥的滲透系數(shù)（（4.54±0.197）x10-6cm/sec）明顯比單獨(dú)DIC混懸液（（2.07±0.133）x10-6cm/sec）的高，P＜0.05；DIC與CsA聯(lián)合混合混懸液中DIC的滲透系數(shù)（（2.71±0.163）x10-6cm/sec）比單獨(dú)DIC混懸液略高，但統(tǒng)計(jì)學(xué)上無差異（P﹥0.05）。（TA+CsA

11、）聯(lián)合混懸液中 CsA的滲透系數(shù)（（71.37±3.13）x10-8cm/sec）較單獨(dú)CsA混懸液(（18.19±3.83）x10-8cm/sec)大， P＜0.05。
　　結(jié)論：
　　藥物溶解度是影響藥物經(jīng)鞏膜給藥后眼內(nèi)生物利用度的主要因素之一。一般來說，藥物溶解度越高，經(jīng)鞏膜傳遞藥物的滲透性越好。然而，對(duì)于不同種類的藥物經(jīng)鞏膜傳遞的滲透性，除了受到藥物溶解度的影響，還受到藥物分子量大小、電荷等因素的影響。我們發(fā)現(xiàn)TA經(jīng)