紫杉醇對(duì)膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎小鼠血管新生抑制作用的研究.pdf

1、背景：
　　血管新生是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)的重要特征之一，在RA滑膜血管翳的形成和生長(zhǎng)中起著核心作用，不可控的新生血管形成可以導(dǎo)致炎細(xì)胞浸潤(rùn)、滑膜組織增生，最終導(dǎo)致軟骨和骨破壞，因此延緩或阻斷RA患者的滑膜血管新生已成為RA治療的重要靶點(diǎn)之一。膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(collagen-induced arthritis，CIA)模型的臨床表現(xiàn)、發(fā)病機(jī)理、病理特征等方面與人RA相似，是研究RA的理

2、想動(dòng)物模型。本課題用中藥紅豆杉提取物紫杉醇(taxol，PTX)干預(yù)CIA小鼠，研究PTX對(duì)CIA小鼠滑膜血管新生的作用。
　　目的：
　　研究PTX對(duì)CIA小鼠滑膜血管新生及VEGF、HIF-1α表達(dá)的影響。
　　方法：
　　用50只C57BL/6(H-2b)小鼠誘導(dǎo)CIA模型，造模后關(guān)節(jié)炎評(píng)分大于4分的CIA小鼠被隨機(jī)分為1.5mg/kg PTX組、1.0mg/kg PTX組、0.5mg/kg PTX組及CI

3、A模型組，每組6只，另外6只未造模的正常小鼠作為正常對(duì)照組。干預(yù)組分別予對(duì)應(yīng)劑量的PTX隔日腹腔注射，對(duì)照組予等體積溶媒，共給藥8次。運(yùn)用視覺(jué)模擬評(píng)分法對(duì)小鼠關(guān)節(jié)炎進(jìn)行評(píng)分;HE染色后對(duì)小鼠關(guān)節(jié)組織進(jìn)行病理學(xué)評(píng)分（從滑膜炎、血管翳和骨破壞三個(gè)方面評(píng)估）;免疫組化法檢測(cè)關(guān)節(jié)滑膜組織微血管的密度(microvessel density，MVD)以及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEG

4、F)、低氧誘導(dǎo)因子1α（hypoxia-inducible factor-α，HIF-1α)的表達(dá);ELISA檢測(cè)小鼠外周血清VEGF和HIF-1α的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　PTX干預(yù)組關(guān)節(jié)炎評(píng)分分別為1.33±0.52、2.00±0.63、3.33±1.03，與CIA模型組（5.67±1.03）比較顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001，P＜0.001，P=0.016)。PTX干預(yù)組關(guān)節(jié)病理總評(píng)分分別為2.50±0.

5、66、3.89±0.86、6.22±0.98，呈劑量依賴性減少，與CIA模型組（7.67±0.79）比較顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001，P＜0.001，P=0.007)。并且PTX能明顯減少CIA小鼠關(guān)節(jié)病理滑膜炎、血管翳及骨破壞評(píng)分。與CIA模型組（110.32±5.06/mm2）相比，PTX干預(yù)組的MVD亦呈劑量依賴性降低（17.05±1.97/mm2，34.73±2.36/mm2，57.55±2.72/mm2，P均＜

6、0.001）。此外，1.5mg/kg PTX組（42.38±3.22）、1.0mg/kgPTX組（74.30±4.14）、0.5mg/kg PTX組（121.69±3.81）滑膜組織的VEGF表達(dá)低于CIA模型組（156.22±4.75;P均＜0.001）;1.5mg/kg PTX組（19.93±2.92）和1.0mg/kg PTX組（31.99±5.60）的滑膜組織HIF-1α表達(dá)低于CIA模型組（51.10±2.86;P均＜0.00

7、1）。1.5mg/kg PTX組（10.70±1.21pg/ml）和1.0mg/kg PTX組（14.75±0.96pg/ml）的外周血清VEGF表達(dá)低于CIA模型組（16.40±1.43pg/ml，P均＜0.001），且1.5mg/kg PTX組（2.17±0.43pg/ml）和1.0mg/kg PTX組（3.47±0.51pg/ml）外周血清HIF-1α表達(dá)亦低于CIA模型組（5.07±1.19pg/ml，P＜0.001，P=0.0