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文檔簡介
1、 目的:觀察過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)的動(dòng)物模型—膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(collagen-induced Arthritis,CIA)大鼠滑膜細(xì)胞的影響,探討RA臨床治療的新靶點(diǎn)。
方法:健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠皮內(nèi)注射II型膠原以建立CIA大鼠模型,然后取其滑膜組織用膠原酶消化法進(jìn)行原代培養(yǎng)及鑒定。取第3-4代的傳代細(xì)胞
2、進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。MTT比色法檢測PPARγ激動(dòng)劑羅格列酮對(duì)滑膜細(xì)胞增殖的影響,計(jì)算各濃度下細(xì)胞的抑制率,以確定羅格列酮最佳實(shí)驗(yàn)濃度。流式細(xì)胞儀檢測PPARγ激動(dòng)劑羅格列酮對(duì)滑膜細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞生長周期的影響,Western-blot檢測不同時(shí)間作用下PPARγ激動(dòng)劑羅格列酮對(duì)滑膜細(xì)胞PPARγ和核因子-κB(NF-κB)水平的影響, ELISA檢側(cè)不同時(shí)間作用下PPARγ激動(dòng)劑羅格列酮對(duì)滑膜細(xì)胞上清液中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)
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