pH-區(qū)帶逆流色譜分離甘蔗皮及蓮屬植物中有效成分的研究.pdf

1、甘蔗和蓮屬植物在我國資源豐富，但是人們對廢棄的甘蔗皮和蓮屬植物中有效成分的研究并不深入，從而造成大量天然植物資源的浪費。pH-區(qū)帶逆流色譜作為一種高效的液-液分配色譜技術，主要根據(jù)不同物質(zhì)疏水性和解離常數(shù)pKa值的差異性來實現(xiàn)分離，具有進樣量大、回收率高等特點。本文應用該技術分離純化甘蔗皮中的酚酸。離子液體是一類性能獨特的萃取溶劑，這不僅因為它具有熱穩(wěn)定性好、不易燃等特點，還因為它可以與水或弱極性有機溶劑形成兩相體系，這使它可以作為溶劑

2、用于萃取分離中。本文將離子液體多選擇性萃取分離特點與pH-區(qū)帶逆流色譜分離優(yōu)勢相結合，研究了離子液體pH-區(qū)帶逆流色譜體系在分離純化蓮屬植物中的應用。主要得到的結論與研究成果如下:
　　1、建立了pH-區(qū)帶逆流色譜分離純化甘蔗皮中酚酸的方法。溶劑體系確定為甲基叔丁基醚-乙腈-水(4∶1∶5，v/v)，以上相作為固定相，下相作為流動相，保留酸TFA濃度為5 mM，洗脫堿NH3H2O濃度為3 mM，從1.00 g的甘蔗皮粗提物中分離出

3、4.8 mg的咖啡酸、12.9 mg的阿魏酸、65.2 mg的香豆酸，三種物質(zhì)的純度分別為93.4％，94.6％和98.8％。
　　2、研究了甘蔗皮酚酸的抗氧化活性能力。采取清除DPPH自由基和總抗氧化能力T-AOC兩種方法對甘蔗皮中分離得到的三種酚酸進行抗氧化活性評價，結果顯示此三種酚酸均有自由基清除能力和抗氧化能力，且從甘蔗皮中分離出來的單一酚酸的抗氧化性強于粗品中的混合酚酸。
　　3、優(yōu)化了蓮植株粗提物的萃取方法。采用

4、抗氧化活性IC50評價指標，優(yōu)化了蓮植株粗提物的萃取方法，結果表明二氯甲烷萃取部位表現(xiàn)出一定的清除DPPH自由基的能力，其IC50值為110.5μg/mL，這說明二氯甲烷萃取部位富含豐富的生物堿抗氧化活性成分。建立了DPPH-HPLC快速篩選方法，從蓮植株中快速識別出六個具有不同程度抗氧化活性的生物堿物質(zhì)。
　　4、建立了離子液體pH-區(qū)帶逆流色譜分離蓮植株中六種生物堿的方法。在基礎逆流色譜溶劑體系上添加離子液體，研究不同類型的離

5、子液體和離子液體加入量對蓮植株中結構相似的生物堿分離效果的影響。將此方法應用于荷葉和蓮子心中生物堿的分離。溶劑體系為正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水-[C4mim][PF6](5∶2∶2∶8∶0.1，v/v)，保留堿和洗脫酸的濃度分別為10mM和3mM。一次性成功從1.00 g蓮子心粗品中得到37.3 mg蓮心堿、57.7 mg異蓮心堿和179.9 mg甲基蓮心堿，其純度分別為93.2％,96.5％和98.8％。同樣從1.05 g荷葉粗品中分

6、離出45.6 mg N-去甲荷葉堿、21.6 mg荷葉堿、11.7 mg蓮堿，純度分別為96.9％，95.6％和91.33％。
　　5、研制了荷葉堿和甲基蓮心堿國家標準樣品。將荷葉和蓮子心中含量較高的荷葉堿和甲基蓮心堿研制成國家標準樣品，采用pH-區(qū)帶逆流色譜大量制備荷葉堿和甲基蓮心堿，并進行了多種條件的HPLC純度鑒定和結構確證。然后進行均勻性和穩(wěn)定性的考察，結果表明均符合國家標準要求，最后聯(lián)合八家實驗室共同定值，確定荷葉堿和甲